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植物生理学实验
希尔反应的观察和反应速率的测定
摘要:
本实验以新鲜的菠菜叶片为实验材料;以菠菜的离体叶绿体为实验对象,由离体叶绿体悬浮液在光下能还原某些氧化剂,根据2,6?-二氯酚靛酚在光下从蓝色到粉红色再到无色的变化,观察希尔反应。在本实验中观察到,加入叶绿体悬浮液的试管,在光下由蓝色变为绿色(由于叶绿体存在的原因);暗处的试管仍为蓝色。
实验原理与实验目的
实验原理:
希尔发现,离体叶绿体悬浮液在光下能还原某些氧化剂(如2,6 -二氯酚靛酚、高铁氰化钾、苯醌、NADP+、草酸等) 2H2O+2A → 2AH2+O2
希尔反应的测定的方法是(1)放氧速率;(2)氧化剂被还原的速率。 本实验中2,6 -氯酚靛酚还原后,溶液由兰色变为无色。
实验目的:
观察和测定希尔反应,了解叶绿体在光合放氧中的作用。
实验材料和方法
实验材料:菠菜
实验器材:离心机、分光光度计、天平、研钵、漏斗、容量瓶、量筒、烧杯、纱布、移液管、台灯等
实验试剂:(1)提取液(0.067M 磷酸缓冲液,pH 6.5 + 0.3M 蔗糖 + 0.01M KCl);(2) 0.1% 2,6 -二氯酚靛酚(溶于0.067M 磷酸缓冲液+0.01%KCl)
实验步骤
1.离体叶绿体悬浮液的制备
称取8克叶片,加10ml预冷提取液研磨,在研钵中捣碎30秒钟后,继续加入15ml冷提取液;
经过二层纱布过滤,去残渣,挤出滤液,置于离心管中。
以1000转/分离心3分钟;弃去沉淀。
以3000转/分离心上层液,8分钟,弃去上清液,沉淀为破碎的叶绿体。
用20ml提取液悬浮沉淀,置于冰浴备用。
2.离体叶绿体对2,6 -二氯酚靛酚的还原作用
取2支试管,分别加入5ml叶绿体悬浮液和1ml 0.1%的2,6 -二氯酚靛酚。一试管照光,另一试管置于黑暗。5-10min后观察溶液颜色的变化。
实验结果与讨论
实验结果:
黑暗处的试管颜色未发生变化,一直都是蓝绿色;?
光照下的试管颜色明显变浅,由较深的蓝绿色变为浅绿色,证明希尔反应的存在,可见离体叶绿体悬浮液在光下能还原某些氧化剂。
实验讨论:
离体叶绿体对染料的还原作用实验中,比较两个处理的溶液颜色有何不同,并解释实验结果。
答:现象:两份叶绿体悬浮液,分别加入1ml 0.1%的2,6 -二氯酚靛酚后,一份在光照条件下,一份在黑暗条件下;在黑暗条件下的叶绿体悬浮液一直是蓝绿色的;而在光照条件下的叶绿体悬浮液在加入1ml 0.1%的2,6 -二氯酚靛酚后为蓝绿色,而放在光下一段时间后叶绿体悬浮液又慢慢变为原来的颜色,浅绿色。
原因:这是由于叶绿素在光照条件下被激活,而释放出电子,从而还原某些氧化剂。2,6 -二氯酚靛酚本来是蓝色的,加入后使得叶绿素提取液变为蓝绿色,而2,6 -氯酚靛酚还原后,溶液变为无色,这时叶绿素提取液又变为原来的颜色,浅绿色。
参考文献:
王英典,刘?宁.?植物生物学实验指导?.?北京:高等教育出版社.(第2版)
1附:质量管理的意义
随着社会主义市场经济体制的逐步建立,质量问题已成为我国经济发展的一个关键。产品质量代表了一个国家的形象,一个民族的精神。美国前总统里根曾说过:“国家的强大依靠能生产高质量的产品和服务的工业能力”。朱镕基总理说:“质量是企业的生命,质量管理是企业管理的纲要”。
从微观上来说,质量是企业赖以生存和发展的保证,是开拓市场的生命线;用户对产品质量的要求越来越高,提高质量能加强企业在市场中的竞争力;产品质量是形成顾客满意的必要因素,因此较好的质量会给企业带来较高的利润回报;质量管理是公司品牌的保护伞,严抓质量管理可以提高品牌美誉度;加强质量管理也是维护人们的生活以及身心健康的必要措施。
从宏观上来说,当今世界的经济竞争,很大程度上取决于一个国家的产品和服务质量。质量水平的高低可以说是一个国家经济、科技、教育和管理水平的综合反映。当今市场环境的特点之一是用户对产品质量的要求越来越高。在这种情况下,就更要求企业将提高产品质量作为重要的经营战略和生产运作战略之一。因为,低质量会给企业带来相当大的负面影响:它会降低公司在市场中的竞争力,增加生产产品或提供服务的成本,损害企业在公众心目中的形象等等。另一方面,以前,价格被认为是争取更多的市场份额的关键因素,现在情况已有了很大变化。很多用户现在更看重的是产品质量,并且宁愿花更多的钱获得更好的产品质量。在今天,质量稳定的高质量产品会比质量不稳定的低质量产品拥有更多的市场份额,这个道理是显而易见的。较好的质量也会给生产厂商带来较高的利润回报。高质量产品的定价可以比相对来说质量较低产品的定价高一些。另外,高质量也可以降低成本,而成本降低也就意味着公司利润的增加。
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