分光光度计基本原理与结构.pptVIP

（二）准直镜和聚光镜：准直镜用来减小光束的尺寸并提供平行光，其多由凹面镜制成。凹面镜的反射镜面大都是镀铝的。在可见光区，铝膜外面常常再镀上一层SiO2保护层。但在紫外区，为了保证较高的反射效率。常常不镀此SiO2保护膜，这种准直镜的维护方法与光栅相同。 聚光镜为一凸透镜。点光源发出的光，经聚光镜后，变成平行光，然后再进入棱镜（或光栅）色散系统。色散后的平行光再经聚光镜会聚后，照射到比色皿上。 * 第二十九页，共45页 三、分光光度计的光学系统简介 分光光度计的光学系统有许多类型，不同类型的光学系统，对测量方法和结果都有一定影响，下面，我们介绍几种常用分光光度计的光学系统。 （－）单光束光学系统：它是分光光度计中最简单的和应用最普遍的一种。它的特点是只有一条光束。通过交换参比和样品的位置，使其分别进入光路。在参比（溶剂）进入光路时，调零。然后将样品进入光路的信号和参比信号进行比较，就可在显示器上读出样品的透过率和吸光度。结构如图4－6所示。 * 第三十页，共45页 * 第三十一页，共45页 单光束分光光度计由于在每个波长都需要变换参比和样品的位置，所以只能手动，不能扫描吸收光谱。它的结构比较简单，使用也有一定限制，但如配置程序控制和打印装置，则对一些常规的定量测定（如医院化验室）还是比较适用的。 国产754型、WFD－SA型、WFZ800D型分光光度计，以及国外的贝克曼DU型、岛津 QC－50、QR－50、日立 EPU－2A型、希尔格 H700型、C－4型等都属于这种类型的仪器。 * 第三十二页，共45页 * 第一页，共45页 许多化学物质具有颜色，有些无颜色的化合物也可以与显色剂作用，生成有色物质。实践证明，有色溶液的浓度越大，颜色越深；浓度越小，颜色越浅。因此，可以通过比较溶液颜色深浅的方法来确定有色溶液的浓度，对溶液中所含的物质进行定量分析。基于比较颜色深浅对溶液进行定量分析的方法称为比色分析法。 * 第二页，共45页 溶液为什么会有颜色，颜色又为什么与浓度有关呢？下面就讨论这个问题。 一、光的互补及有色物质的显色原理 1．光的波粒二象性 光是能的一种表现形式，是电磁波的一种。光在真空中以直线方式传播，在不同的介质处发生反射、折射、衍射、色散、干涉和偏振等现象。可用波长、频率、传播速度等参量来描述，即光具有“波动性”。光的颜色即由光的波长决定，人眼能感觉到的光称为可见光，其波长在400～750nrn之间。在可见光之外是红外光和紫外光。 * 第三页，共45页 同时，光也具有“粒子性”，光电效应就是一个很好的例子。光的粒子性理论认为，光是由“光子”（或称“光量子”）所组成。在辐射能量时，光是以一份一份的能量E的形式辐射的，同时光被吸收时，能量也是一份一份被吸收的。这每一份能量的大小为hυ。光子的能量与波长的关系为 E=hυ= hc／λ 式中E为光子的能量（J：焦耳），υ为频率，h为普朗克常数（6.63×10-34J?S），c为光速，λ为光的波长 * 第四页，共45页 因此，不同波长的光，其能量不同，短波能量大，长波能量小。 2。光的显色原理 若把某两种颜色的光，按一定的强度比例混合，能够得到白色光，则这两种颜色的光叫做互补色。图4－1中处于直线关系的两种光为互补色。如绿光和紫光为互补色，黄光和蓝光为互补色等等。 各种溶液会呈现出不同的颜色，其原因是溶液中有色质点（分子或离子）选择性地吸收某种颜色的光。实验证明：溶液所呈现的颜色是其主要吸收光的互补色。如一束白光通过高锰酸钾溶液时，绿光大部分被选择吸收，其它的光透过溶液。从互补色示意图可以看出，透过光中只剩下紫色光，所以高锰酸钾溶液呈紫色。 * 第五页，共45页 * 第六页，共45页 二、朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律 溶液颜色的深浅与浓度之间的关系可以用吸收定律来描述。它是由朗伯定律和比尔定律相结合而成的，所以叫朗伯-比尔定律。原子吸收分光光度计也符合这个定律。 溶液对光的吸收 当一束强度为I的平行单色光照到溶液时，一部分光被溶液吸收，一部分光被界面散射，其余的光则透过溶液，如图4-2所示 * 第七页，共45页 * 第八页，共45页 有： I0=I a+ I r+ I t I0--入射光强度 I a--吸收光强度 I r--反射光强度 I t--透射光强度 通常由于I r很小可忽略不计，上式可简化为 I0=I a+ I t 透射光I t与入射光强度I0之比为透光率或透光度，用T表示： T= I t/ I a 透光率的负对数称为吸光度或光密度或