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实验二植物染色体制片及有丝分裂观察 第1页，共15页，编辑于2022年，星期六 实验目的： 学习并掌握植物染色体玻片标本的制作方法; 观察植物细胞有丝分裂过程及各个时期的染色体行为； 第2页，共15页，编辑于2022年，星期六 预习要求 实验目的 预习要求 学习并掌握植物染色体玻片标本的制作方法; 观察植物细胞有丝分裂过程及各个时期的染色体行为 流程: 材料要求,取材方法,实验流程和各操作步骤实施原因 发根→预处理→固定→解离→低渗→ 软化→染色→压片→镜检 间期，前期，中期，后期，末期 第3页，共15页，编辑于2022年，星期六 实验原理 植物的生长旺盛的分生组织（如根尖、茎尖、幼叶等）都在进行着有丝分裂。取这些组织为材料，经过固定后迅速杀死细胞，并使细胞内的物质和生活状态得以保持，再经过解离、染色、压片等过程，在显微镜下就可以看到大量处于有丝分裂各个时期的细胞，并进行染色体行为的观察。 有丝分裂中期的染色体具有典型的形态特征，并容易计数。为了获得更多的中期染色体装片，可以采用常用的药物处理方法，阻止纺锤体的形成，使细胞分裂停止在中期，便于进行观察。 第4页，共15页，编辑于2022年，星期六 实验材料 洋葱、大蒜的鳞茎，玉米、蚕豆的种子等。本实验选用大蒜。 实验用品 用具：显微镜、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、水浴锅、酒精灯、铅笔、吸水纸等。 药品：蒸馏水、卡诺氏固定液、45%醋酸、秋水仙素、改良苯酚品红染液等。 第5页，共15页，编辑于2022年，星期六 实验步骤： 1根尖培养：将大蒜瓣放在盛有清水的培养皿（烧杯）中，让根部接触水，在20-25℃光照下培养，待根尖长到1-2cm时，剪下备用。剪取根尖的时间以上午9时左右为好。 2 预处理：将剪取的新鲜材料于0.02%秋水仙素溶液中室温下处理3-4h。 为什么要限制取材时间？ 预处理的目的？ 还有其他方法吗？ 第6页，共15页，编辑于2022年，星期六 实验步骤： 3 固定：将经过预处理和未经预处理的材料冲洗后转移至卡诺氏固定液中，室温下处理24h。水洗放入70%乙醇中保存。 4 解离：将冲洗后的根尖放入0.1mol/L的HCl中， 60℃下处理8-10min（可视具体情况而定）。 固定的作用？固定剂的组成？对固定剂配制的要求？ 解离的目的？如何判断解离的效果？其他的解离方法？ 第7页，共15页，编辑于2022年，星期六 5 软化：将解离好的根尖冲洗后，放入45%醋酸中软化10min左右。 请问解离与软化的目的是什么？ 6 染色：切取1-2mm的分生区，用改良苯酚品红染液染色10-20min。 为保证染色的充分要注意哪些问题？ 第8页，共15页，编辑于2022年，星期六 7 压片：盖上盖玻片，在酒精灯上烤片。然后固定盖玻片，用铅笔垂直、用力敲击盖片几下，将材料压成一层细胞。 8 镜检：先在低倍镜下找到细胞，再换成高倍镜仔细观察有丝分裂过程中染色体的行为。 压片时应注意的问题有哪些？ 请注意比较经过预处理和未经预处理的材料有何不同？ 第9页，共15页，编辑于2022年，星期六 实验报告要求： 1 说明实验过程中每步的作用是什么? 2 绘图表示各时期染色体的行为。 3 比较经过预处理和未经预处理的两个装片的不同，为什么会不同？ 第10页，共15页，编辑于2022年，星期六 第11页，共15页，编辑于2022年，星期六