PALL颇尔-实验操作指南-4.除病毒过滤小试操作-SV4.pdf

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SV4 除病毒过滤小试操作 1. 实验设备 压力容器(C3EP1),调压阀,膜片夹具,耐压管,天平,DJL 膜片,SV4 膜片 2. 实验试剂 纯化水,缓冲液,料液 3. 实验步骤 (1) 参照颇尔公司标准方法以FTKDJL 为预过滤膜、FTKSV4 为除病毒滤膜进行恒压 除病毒。 将压缩空气出口→调压阀→耐压管→压力容器→膜片夹持器正确连接,见下图。 (2) 使用FTKDJL 过滤器,对样品进行除病毒的预过滤,恒定压力 1.0bar,过程中记 录过滤时间和过滤重量/体积,预过滤完成后对过滤设备进行清洗。 (3) 将润湿好的FTKSV4 膜片在膜片夹持器中正确安装。 (4) 完整性检测:在5.8bar 压力下检测下游最后一滴液体的滴落时间大于60 秒认 为滤膜完好。 (5) 将纯化水(DJL 过滤后)倒入压力罐中,缓慢调节调压阀,使压力逐步稳定到 2.1bar 时5 分钟后进行 FTKSV4 测试,记录 10 分钟过滤体积,换算后滤速在 0.56~0.81ml/min 范围内。 (6) 纯化水排空后,将缓冲液(DJL 过滤后)倒入压力容器中,调节压力逐步稳定 到2.1bar 对膜片进行平衡。 (7) 排空缓冲液后,将FTKDJL 过滤后的样品倒入压力容器中,直接升压至3.1bar , 进行FTKSV4 膜片恒压过滤,过程中记录过滤时间和过滤重量/体积。 (8) 使用 10ml 缓冲液或纯化水冲洗滤膜,排空后系统稳定5 分钟,下游没有液体 流出,用硅胶管连接出口浸泡到水中,60 秒内没有气泡流出,系统检漏合格。 (9) 过滤前后样品分别取样,测定蛋白浓度计算回收率。 4. 实验结果 滤膜类 过滤时 过滤体 过滤通 平均滤 过滤压 滤前浓 滤后浓 样品回 型 间 积 量 速 力 度 度 收率 [L/m2 [mg/m [mg/ [min] [mL] ] [LMH] [bar] L] mL] %

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