2.2.1 动物细胞培养和核移植技术.ppt

专题2.2.1 动物细胞培养和核移植技术;学习目标;同步学案;3.动物细胞培养过程中，两次使用胰蛋白酶，第一次目的是 ，第二次目的是 。;4.完成下表;;知识与技能; 将组织取出来后，先用胰蛋白酶等使组织分散成单个细胞，然后配制成一定浓度的细胞悬浮液，再将该悬浮液放入培养瓶中，在培养箱中培养，这个过程叫做原代培养。细胞在培养瓶中贴壁生长。随着细胞的生长和增殖，培养瓶中的细胞越来越多，需要定期地用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，配制成细胞悬浮液，分别装到两个或多个培养瓶中培养，这称为传代培养。 原代培养的细胞一般传到10代左右就不容易传下去了，细胞的生长就会出现停滞，大局部细胞衰老死亡。但是有极少数的细胞能度过“危机〞而继续传下去，这些存活的细胞一般能传到40~50代，这种传代细胞叫做细胞株。细胞株细胞的;的遗传物质没有发生改变。当细胞株传到50代以后又会出现“危机〞，不能再传下去。但是有局部细胞的遗传物质发生了改变，并且带有癌变的特点，有可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞叫做细胞系。 注: a.胰蛋白酶处理使细胞分散。 b.在培养液中培养，这时的培养称为原代培养。 c d.时的培养称为传代培养，以50代为界限。 e.时的细胞称为细胞株，之后称为细胞系。 d.时的细胞发生了癌变。;4.动物细胞培养与植物组织培养的区别。 动物细胞培养与植物组织培养有许多相似之处，也有许多 不同点。一是它们用的培养基不同，植物组织培养用的一 般是固体培养基，而动物细胞培养用的一般是液体培养 基。二是它们的培养基的成分不同。动物细胞培养的培养 液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐和维生素，另外还 有动物血清。植物组织培养所需要的培养基包含植物生长 和发育的全部营养成分，如矿质元素、蔗糖、维生素、植 物激素和有机添加物，没有动物血清。三是植物组织培养 最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体 细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是同一种的细胞。;5.把握动物体细胞移植的特点 动物体细胞移植依据的原理还是细胞的全能性，与植物组织 培养一样属于无性生殖。虽然细胞核内具有开展成为一个完 整个体所需的全套基因，但动物体细胞分化程度较高，因此 很难表达全能性。卵细胞体积大，易于操作，含有促使细胞 核表达全能性的物质和营养条件。将体细胞核移植入去核卵 细胞内，既保证了重组细胞的完整性，又能刺激体细胞核表 达其全能性，开展成为一个新的个体。动物体细胞移植产生 的新个体的亲本有三个：体细胞核供体、卵细胞细胞质供 体、代孕母体。新个体细胞核基因型与体细胞核供体完全一 ;;典例精析;【解析】选取胚胎或幼龄动物的器官或组织是因为它们分裂能力较强。动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质，易被胰蛋白酶催化分解，从而使细胞别离出来。当贴壁生长的细胞分裂生长到外表相互接触时就停止分裂增殖，需定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来，配成细胞悬浮液。动物细胞培育传至50代左右，局部细胞的遗传物质发生改变，并且带有癌变的特点，能在培养条件下无限制地传代下去。;变式练习1 为了使用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬浮液，选取来的动物组织应选用以下哪种物质处理( ) A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.盐酸 D.胰脂肪酶;例2 以下属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是( ) A.培养基成分不同 B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 C.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株;变式练习2 离体的植物组织或细胞在适当培养条件下发育成完整的植株，离体动物体细胞却没有发育成动物的成熟个体，原因是( ) A.动物细胞内没有成套的遗传物质 B.动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制，分化潜能 变弱 C.动物细胞的细胞核太小 D.动物细胞的全能性低于植物细胞;例3 答复以下有关动物细胞培养的问题 〔1〕在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞外表 时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成细胞层数 是。要使贴壁的细胞从瓶壁上别离下来，需要用酶处理，可用的酶是。