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第2十一章RNA的生物合成会计学第1页/共91页在生物界,RNA合成有两种方式:?一是DNA指导的RNA合成,也叫转录,此为生物体内的主要合成方式,也是本章介绍的主要内容。另一种是RNA指导的RNA合成(RNA-dependent RNA synthesis),也叫RNA复制(RNA replication), 由RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase)催化,常见于病毒,是逆转录病毒以外的RNA病毒在宿主细胞以病毒的单链RNA为模板合成RNA的方式。 RNADNA 第2页/共91页转录 (transcription) 是生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 转录第3页/共91页转录的知识是理解许多生物学现象和医学问题所必需的。对于RNA生物过程的调节可以导致蛋白质合成速率的改变,以及由此而引发的一系列代谢变化, 因此,了解RNA代谢的基本原理就甚为重要。这些原理既关系到所有生物是如何适应环境变化的,也关系到细胞结构和功能的分化机制。 第4页/共91页复制和转录的区别第5页/共91页参与转录的物质:原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板: DNA酶 : RNA聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol)其他蛋白质因子第6页/共91页第一节原核生物转录的模板和酶Templates Enzymes in Prokaryotic Transcription第7页/共91页一、原核生物转录的模板DNA分子上转录出RNA的区段,称为结构基因(structural gene)。转录的这种选择性称为不对称转录(asymmetric transcription),它有两方面含义:在DNA分子双链上,一股链用作模板指引转录,另一股链不转录;其二是模板链并非总是在同一单链上。第8页/共91页DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链,称为模板链(template strand),也称作有意义链或Watson链。相对的另一股单链是编码链(coding strand),也称为反义链或Crick链。 5′···GCAGTACATGTC ···3′编码链3′··· c g t g a t g t a c a g ···5′模板链转录mRNA5′···GCAGUACAUGUC ···3′翻译蛋白质N······Ala · Val · His · Val ······C转录方向转录方向第9页/共91页不对称转录结构基因5?3?3?5?编码链模板链模板链编码链第10页/共91页二、RNA合成由RNA聚合酶催化(一)RNA聚合酶能直接启动RNA链的合成DNA依赖的RNA聚合酶催化合成RNA;RNA合成的化学机制与DNA依赖的DNA聚合酶催化DNA合成相似。 ( NMP )n + NTP → ( NMP ) n+1 + PPiRNA延长的RNA第11页/共91页DNA聚合酶在启动DNA链延长时需要引物存在,而RNA聚合酶不需要引物就能直接启动RNA链的延长。RNA聚合酶和DNA的特殊序列——启动子(promoter)结合后,就能启动RNA合成。 第12页/共91页(二)RNA聚合酶由多个亚基组成???????????第13页/共91页核心酶 (core enzyme)全酶 (holoenzyme)转录起始阶段转录延长阶段 调控序列结构基因5?3?3?5?RNA-pol第14页/共91页三、RNA聚合酶结合到DNA的启动子上起动转录转录是不连续、分区段进行的。每一转录区段可视为一个转录单位,称为操纵子(operon)。操纵子包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。第15页/共91页调控序列中的启动子是RNA聚合酶结合模板DNA的部位,也是控制转录的关键部位。原核生物以RNA聚合酶全酶结合到DNA的启动子上而起动转录,其中由σ亚基辨认启动子,其他亚基相互配合。 对启动子的研究,常采用一种巧妙的方法即RNA聚合酶保护法。第16页/共91页RNA聚合酶保护法RNA聚合酶保护区结构基因3?5?5 ?3 ?3 ?5 ?3?5?-50-40-30-20-10110第17页/共91页用RNA聚合酶保护法研究转录起始区-35 区开始转录-10 区T T G A C AA A C T G TT A T A A T Pu A T A T T A PyRNA-pol辨认位点(recognition site) (Pribnow box)第18页/共91页RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合:第19页/共91页第20页/共91页第二节原核生物的转录过程The Process of Transcription in Prokaryote第21页/共91页一、转录起始需要R
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