细胞工程基础(学时).pptVIP

基因调控—同源框 STM（SHOOTMERISTEMLESS）基因以及它们的直系同源（orthologues）基因均参与了茎尖分生组织的分化调控。 在转Homeobox相关基因的烟草植物中还检测分析到赤霉素含量减少和生长素含量上升的内源激素变化，这也暗示，Homeobox基因可能通过一些调节因子（如激素）介导调控器官分化。 细胞工程-细胞工程基础 1.3 器官发生 当前95页，共135页，星期日。 基因调控—细胞周期基因 细胞分裂周期基因参与了发育调控。 植物编码细胞周期依赖性激酶基因cdc2在离体培养中，调节细胞进入分裂状态的过程起着关键性作用，在玉米和大麦离体培养中，cdc2的表达高峰发生在不定芽形成的过程中，在培养初期的表达量较少，同时，该基因的表达部位处于分生组织的外层细胞，因此认为，cdc2基因对分生组织的形成和维持分生组织状态均有重要作用。 细胞工程-细胞工程基础 1.3 器官发生 当前96页，共135页，星期日。 基因调控—细胞周期基因 Banno等（2001）从拟南芥根培养再生芽的体系中克隆了一个增强芽再生能力的基因ESR1，将该基因与35S启动子连接转化拟南芥，在有细胞分裂素存在的情况下转基因外植体可以显著提高不定芽的分化率。而生长素不能诱导该基因表达，同样也不能提高不定芽分化频率。 细胞工程-细胞工程基础 1.3 器官发生 当前97页，共135页，星期日。 基因调控—细胞周期基因 从拟南芥中鉴定出3个与离体器官发生有关的基因SRD1、SRD2和SRD3，当它们发生隐形突变时，在离体培养中表现出器官发生在不同时期受阻，3个基因均定位于拟南芥I号染色体上。 细胞工程-细胞工程基础 1.3 器官发生 当前98页，共135页，星期日。 基因调控—细胞周期基因 Low等（2001）通过RT-PCR技术克隆了一个含有亮氨酸拉练基因bZIP（PKSF1），该基因编码一个亮氨酸拉链转录因子，其表达发生在 芽形成之前，在有不 定芽形成的愈伤组织 中其表达量比非分化 愈伤组织高6倍。 细胞工程-细胞工程基础 1.3 器官发生 当前99页，共135页，星期日。 光照对器官分化的影响 光照是离体培养中比较复杂的调节因子，光照时间、强度以及光质对器官分化均有影响。 离体培养中光照的控制一般是分阶段进行的，诱导培养中通常不给光照或只提供弱的散射光，以有利于愈伤组织的形成。进入分化阶段后，则给予较强的光照，光照时间一般为每天14-16小时。连续的光照有利于培养细胞维管组织的形成，而一定的昼夜光照周期则有利于极性建立和形态发生。 细胞工程-细胞工程基础 1.3 器官发生 当前100页，共135页，星期日。 光照对器官分化的影响 培养条件下，光合作用能力较弱，光照的作用更大程度上是调节细胞的分化状态，而不是合成光合产物。 光照对器官发生的调节可能与调节培养物的内源激素平衡有关，光照还可能影响生长素的信号转导系统，调整生长素的极性运输，从而引起器官分化。 光质对器官分化的影响可能与光受体精确调节系统有关。 细胞工程-细胞工程基础 1.3 器官发生 当前101页，共135页，星期日。 离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物（不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞），统称为体细胞胚或胚状体。 这一定义有以下几方面的界定： 其一，体细胞胚是离体培养的产物，只限于离体培养范围使用，以区别于无融合生殖胚； 其二，体细胞胚起源于非合子细胞，以区别于合子胚； 其三，体细胞经过了胚胎发育过程，以区别于离体培养中器官发生形成个体的途径。 细胞工程-细胞工程基础 1.4 体细胞胚胎发生 当前102页，共135页，星期日。 体细胞胚的形成 体细胞胚的发育与结构特点 影响体细胞胚发生的因素 体细胞胚发生的生化与分子基础 细胞工程-细胞工程基础 1.4 体细胞胚胎发生 当前103页，共135页，星期日。 直接途径 间接途径 体细胞胚的形成 细胞工程-细胞工程基础 1.4 体细胞胚胎发生 当前104页，共135页，星期日。 激素对细胞再分化的调控作用 激素是离体培养条件下调控细胞脱分化和再分化的主要因素，其中生长素和细胞分裂素是两类主要的调控培养条件下细胞生长和分化的植物激素。 在有些试验中也显示，赤霉素（GA3）、脱落酸（ABA）、乙烯（EHT）等也在细胞分化中起到一定调节作用。 细胞工程-细胞工程基础 1.2 细胞全能性及其表达 当前63页，共135页，星期日。 激素对细胞再分化的调控作用 1949年，法国植物学家Camus，把一种菊苣小的营养芽嫁接在其根的组织培养物的上表面，几天以后，处于芽下的薄壁细胞中分化出了维管束。这些维管束与芽的维管组织相接在一起。同时，他在愈伤组织