蛋白质的分离和纯化.pptVIP

凝胶色谱柱的装填 凝胶的前处理：配置凝胶悬浮液：计算并称取一定量的凝胶浸泡于蒸馏水或洗脱液中充分溶胀后，配成凝胶悬浮液。 凝胶色谱柱的装填方法：A、固定：将色谱柱装置固定在支架上。B、装填：将凝胶悬浮液一次性的装填入色谱柱内，装填时轻轻敲动色谱柱，使凝胶填装均匀。 注意：1、凝胶装填时尽量紧密，以降低凝胶颗粒之间的空隙。 2、装填凝胶柱时不得有气泡存在：因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。 第31页，共43页，编辑于2022年，星期六 关于蛋白质的分离和纯化 第1页，共43页，编辑于2022年，星期六 一、蛋白质的分离 2.根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同种类的蛋白质。 Q:下列蛋白质如何提取？ 酸性蛋白质； 水溶性蛋白质； 脂溶性蛋白质； 偏碱性溶液 透析液（中性缓冲液） 有机溶剂 原理 1.根据细胞的结构特点，选择不同的破碎细胞的方法（如研磨法、超声波法、酶解法等），使各种蛋白质释放出来。 第2页，共43页，编辑于2022年，星期六 一、蛋白质的分离 1.抽提方法： （1）酸性蛋白质： （2）水溶性蛋白质： （3）脂溶性蛋白质： 偏碱性溶液 透析液（中性缓冲液） 有机溶剂 第3页，共43页，编辑