蛋白质的修饰和表达课件课件.pptVIP

例如，含有酮基的对乙酰苯丙氨酸。 含有这个氨基酸的蛋白质能够选择性的被荧光标记用以跟踪和成像，或是被生物素标记用作灵敏度检出。许多试剂都可以通过酮基这个化学手柄选择的结合到目标蛋白上。 第55页，共110页，编辑于2022年，星期六 基因融合的用途 上述这些基因融合策略，主要是有利于外源基因的表达、表达产物的分离、纯化以及细胞定位。作为蛋白质分子改造可以借用这些策略对蛋白质分子中的特定序列、结构元件乃至结构域通过基因剪接来进行操作。 第56页，共110页，编辑于2022年，星期六 第三节 重组蛋白质的表达 重组蛋白质在大肠杆菌中的表达 重组蛋白质在酵母细胞中的表达 重组蛋白质在哺乳类动物细胞中的表达 第57页，共110页，编辑于2022年，星期六 一、大肠杆菌中表达体系的优点 大肠杆菌(E.coli)表达体系是目前应用最广的一个外源基因表达体系，是外源基因表达的首选体系。 利用大肠杆菌作为表达体系的优点： 遗传学和生理学背景清楚； 容易培养，特别是高密度发酵； 外源基因经常可以达到高效表达。 第58页，共110页，编辑于2022年，星期六 大肠杆菌表达体系的缺点 大肠杆菌系统最大的不足之处是不能进行典型真核细胞所具有的复杂的翻译后修饰，如糖基化、烷基化、磷酸化、特异性的蛋白水解加工等；而广泛二硫键的形成以及外源蛋白质组装成多亚基复合体的能力也受到限制