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- 2022-04-07 发布于广东
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几条多肽链借助非共价键连接在一起,称为寡聚蛋白质,如血红蛋白为四聚体 第28页,共66页,编辑于2022年,星期六 ②.拆分蛋白质的多肽链 寡聚蛋白质的亚基必须拆分。可用变性剂如8 mol/L尿素、6 mol/L盐酸胍或高浓度盐处理。 第29页,共66页,编辑于2022年,星期六 ③.拆开多肽链内的二硫桥 若亚基间通过二硫桥(S-S)交联,如胰岛素(含两条多肽链)和α-胰凝乳蛋白酶(含3条多肽链)则可在可用8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍存在下,用过量的?-巯基乙醇处理,使二硫键还原为巯基,然后用烷基化试剂保护生成的巯基,以防止它重新被氧化。 ④.测定每一条多肽链的氨基酸组成 分离纯化的多肽链一部分样品完全水解,测定氨基酸组成,计算氨基酸成分的分子比或各种残基的数目。 第30页,共66页,编辑于2022年,星期六 现在已有氨基酸自动分析仪和蛋白质序列仪,对蛋白质多肽氨基酸排列顺序的测定提供了极大的方便。 第31页,共66页,编辑于2022年,星期六 ⑤.鉴定多肽链的N端和C端残基 多肽链的另一部分样品进行末端残基的鉴定,以便建立两个重要的氨基酸序列参考点。 ⑥.裂解多肽链成较小的片段 用两种或几种不同的断裂方法(指断裂点不一样)将每条多肽链样品降解成两套或几套重叠的肽段或称肽碎片。每套肽段进行分离、纯化,并对每一纯化了的
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