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我国是棉花的生产和消费大国。棉花在种植过程中,常常会受到一些害虫的侵袭,其中以棉铃虫最为常见。棉铃虫可以使棉花产量减少三分之一,严重时,甚至能使一片棉田绝收。大量施用农药杀虫不仅会提高生产成本,还可能造成农产品和环境的污染。要是能培育出自身就能抵抗虫害的棉花新品种,这一问题就会迎刃而解,我国拥有自主知识产权的转基因抗虫棉就是在这样的背景下产生的。为什么传统的杂交育种方法培育不出抗虫棉,基因工程却可以呢?基因工程是如何进行操作的?它给我们的生产和生活带来了怎样的影响?;;;;;本章内容思维导图; 第1节 重组DNA技术的基本工具;本节聚焦
1. 重组DNA技术所需的三种基本工具是什么?它们的作用分别是什么?
2. 基因工程载体需要具备什么条件?; 番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木瓜被这种病毒感染后,产量会大大下降。科学家通过精心设计,用“分子工具”培育出了转基因番木瓜,它可以抵御番木瓜环斑病毒。
DNA双螺旋的直径只有2 nm,对如此微小的分子进行操作,是一项非常精细的工作,更需要专门的“分子工具”。那么,科学家究竟用到了哪些“分子工具”?这些“分子工具”各具有什么特征呢?;培育转基因番木瓜; 科学家用到了限制酶、DNA连接酶、载体等“分子工具”。限制酶能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并将DNA双链切断,形成具有黏性末端或平末端的片段。DNA连接酶催化磷酸二酯键的形成,即催化一个DNA片段3’端的羟基与另一个DNA片段5’端的磷酸基团上的羟基连接起来形成酯键。载体上可以插入外源基因,它能携带该基因进入受体细胞,并在受体细胞中进行自我复制,或者整合到受体DNA上,随着受体DNA同步复制。载体一般还带有标记基因,以便进行重组DNA分子的筛选。 ; 基因工程是指按照人们的愿望,通过转基因等技术,赋予生物新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看,由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫作重组DNA技术。;;“分子手术刀”;[资料1]1970年,史密斯(H.D.Smith)等人首次从大肠杆菌中提取出了一种限制性内切核酸酶(restriction endonuclease)。这种内切核酸酶能够识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特异性的位点上把双链DNA分子“切割”开(如图)。DNA被切割后所产生的交错的切口,也就是在每条链的一端留下的单链末端,叫做黏性末端。;1.全称和简称
全称——______________
简称——_______
2.来源
主要是从________中分离纯化出来的
3.作用(功能)*
①能够识别_____DNA分子的某种_____________
②使______链中_______的__________断开。
*确切来说应该是催化磷酸二酯键断开
*该过程“特定”体现了酶的专一性;4.作用部位
___________________________________
___________________________________;5.识别序列
大多数限制酶的识别序列由___个核苷酸组成,也有少数限制酶的识别序列由___个、___个或__________的核苷酸组成。;6.切割结果
DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——________和_______
*当限制酶在它识别序列的_________将DNA分子的两条链分别切开时,产生的是________;
*当限制酶在它识别序列的________切开时,产生的是______;;(1)实例1——EcoRⅠ限制酶切割
*EcoRⅠ识别序列为GAATTC
*EcoRⅠ切割部位为GA之间的磷酸二酯键; ;(2)实例2——SmaⅠ限制酶切割
*SmaⅠ识别序列为CCCGGG
*SmaⅠ切割部位为CG之间的磷酸二酯键;平末端 平末端;现学现用:写出下列限制酶切割形成的黏性末端
BamHⅠ________ EcoRⅠ________
HindⅢ________ BglⅡ ________ ;现学现用:
以下黏性末端是由__种限制酶作用产生的
; ;旁栏思考(p71):根据你所掌握的知识,你能推测这类酶存在于原核生物中的作用是什么吗?; 限制酶是如何命名的呢?是用生物属名的头一个字母与种加词的头两个字母,组成了3个字母的略语,以此来表示这个酶是从哪种生物中分离出来的。例如,一种限制酶是从大肠杆菌(Escherichia coli)的R型苗株分离來的就用字母EcoR表示;如果它是从大肠杆茵R型菌林中分离出来的第一种限制酶,则进一步表示成EcoRI。;; 缺口怎么办?;[
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