植物组织培养的基本原理.pptVIP

外植体先脱分化形成愈伤组织， 再由愈伤组织的某些细胞重新“决定”为胚性细胞， 进而分化出体细胞胚胎。 多数体细胞胚胎通过该途径形成的。通常包括2个阶段： （1）胚胎发生丛（Embryogenic clump，EC） 是由液泡小、细胞质浓的小细胞构成。 （2）胚状体的发育。 将EC转入降低或除去生长素、降低还原氮的培养基上培养即可。 2. 间接途径 第31页，共43页，编辑于2022年，星期一 关于植物组织培养的基本原理 第1页，共43页，编辑于2022年，星期一 细胞全能性概述 细胞脱分化 细胞再分化 第一节 植物细胞全能性和细胞分化 第2页，共43页，编辑于2022年，星期一 植物细胞的全能性：1902年由Haberlandt提出， 植物体细胞在适当的条件下， 具有不断分裂和繁殖、发育成完整植株的能力。 （细胞核） 20世纪80年代， 每一个植物细胞具有该植物的全部遗传信息， 在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息， 分化出植物有机体所有不同类型细胞， 形成不同类型的器官甚至胚状体， 直至形成完整再生植株。 一、植物细胞的全能性（Totipotency） 第3页，共43页，编辑于2022年，星期一 从一个细胞发育成一个植株 继代 鱼雷 球形 心形 第4页，共43页，编辑于2022年，星期一 植物细胞全能性的证明 1958年，美国斯图尔德（Steward）等人， 用胡萝卜根韧皮部的细胞进行培养，得到了完整植株， 并且这一植株能够开花结实，首次证实细胞全能性； 1964年印度Guha和Maheshwari 成功地在毛叶曼陀罗花药培养中， 由花粉诱导得到单倍体植株。 第5页，共43页，编辑于2022年，星期一 细胞全能性的相对性 细胞全能性并不意味着任何细胞均可以直接产生植物; 植物细胞全能性的表现程度存在明显的差异。 细胞按照分裂能力分为3类 第一类：始终保持分裂能力，如茎尖、根尖分生组织及形成层细胞； 第二类：永久失去分裂能力的终端分化细胞， 如筛管、导管、气孔保卫细胞等特化细胞； 第三类：在通常情况下不分裂， 但在受到外界刺激后可重新启动分裂的细胞， 如表皮细胞及各种薄壁细胞。 第6页，共43页，编辑于2022年，星期一 一个植物细胞向分生状态回复过程所能进行的程度，取决于它在自然部位上所处位置和生理状态。 营养生长中心 形成层 薄壁细胞 厚壁细胞（木质化细胞） 特化细胞（筛管、导管细胞） 第7页，共43页，编辑于2022年，星期一 细胞全能性 脱分化 个体再生 再分化 细胞分裂 细胞全能性的表达 是通过细胞脱分化（dedifferentiation）和再分化（redifferentiation）实现的， 在大多数情况下，脱分化是细胞全能性表达的前提， 再分化是细胞全能性表达的最终体现。 第8页，共43页，编辑于2022年，星期一 二、植物细胞分化 1. 定义 分化（differentiation） 植物体各个部分出现异质性的现象， 体现在细胞分化、组织分化、器官分化三个水平上。 细胞分化 导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在的发育方式改变的过程。 是基因选择性活化或阻遏的结果。 细胞分化是组织分化和器官分化的基础， 是离体培养再分化和植株再生得以实现的基础。 第9页，共43页，编辑于2022年，星期一 2. 植物细胞分化的某些规律和机理 （1）细胞分化分为形态结构分化和生理生化分化两类， 生理生化分化在形态结构分化之前。 （2）植物中细胞发育的途径一旦被“决定”（determination）， 通常不易改变。 而离体培养可以通过脱分化而丧失这种“决定”。 （3）分化与极性（Polarity）关系密切。 第10页，共43页，编辑于2022年，星期一 （4） 细胞分裂对细胞分化具有重要作用。 特定环境条件下进行的细胞分裂可以导致特定的细胞分化， 由不均等分裂形成的分化细胞说明了细胞质在细胞分化中的作用。 （5）植物生长调节剂有明显调节作用。 如生长素类与细胞分裂素类比值， 高，促进生根； 低，促进长芽。 （6）染色体和DNA的变化对细胞分化影响比较大。 如核内多倍体的形成