植物组织培养的基本技术.pptVIP

3、GA ( gibberellic acid赤霉素) 培养基中添加的是GA3，主要用于促进幼苗茎的伸长生长，促进不定胚发育成小植株；赤霉素和生长素协同作用，对形成层的分化有影响，当生长素/赤霉素比值高时有利于木质部分化，比值低时有利于韧皮部分化。 第31页，共78页，编辑于2022年，星期一 高 有利于根的形成和愈伤组织 生长素/细胞分裂素 适中 有利于根芽的分化 低 有利于芽的形成 生长调节物质的使用甚微，一般用mg／L表示浓度。一般生长素浓度的使用为0.05～5mg／L，细胞分裂素0.05～10mg／L。 第32页，共78页，编辑于2022年，星期一 培养体支持材料 1.琼脂 A 用量7－10g/L B 新买应试凝固力 2.其它　 玻璃纤维　滤纸桥　海绵等 ▲ 第33页，共78页，编辑于2022年，星期一 辅助性物质 抗生素 抗氧化物 活性炭 天然复合物 ▲ 第34页，共78页，编辑于2022年，星期一 1.常用种类：青霉素　链霉素　　　　　　　 庆大霉素等 2.用量：5－20% 3.注意：抗生素对组织生长有抑制　　　　作用，使用要慎重 抗生素 第35页，共78页，编辑于2022年，星期一 　　　　抗氧化物 常用抗氧化剂及使用：半胱氨酸、VC（50－200mg/L液洗涤外植体伤口表面）。 　活性炭 1.作用：具吸附作用；茎尖初代培养可防褐化；促进新梢增殖（浓度0.1-0.2%）；促进生根；防止组培苗玻璃化（浓度0.3%）。利于胚胎培养。　　　　　　　　　　　　　2.常用浓度：0.5-10g/L　　　　　　　　 3.注意：活性炭具副作用。 ▲ 第36页，共78页，编辑于2022年，星期一 椰乳：一般使用浓度在100～200ml／L 它在愈伤组织和细胞培养中有促进作用。在马铃薯茎尖分生组织和草莓微茎尖培养中起明显的促进作用。 香蕉：用量为100～200ml／L。用黄熟的小香蕉，加入培养基后变为紫色。对pH值的缓冲作用大。主要在兰花的组织培养中应用，对发育有促进作用。 马铃薯(potato)：去掉皮和芽后，加水煮30min，再经过过滤，取其滤液使用。用量为150～200g／L，对pH值缓冲作用也大，添加后可得到健壮的植株。 水解酪蛋白：为蛋白质的水解物，主要成分为氨基酸，使用浓度为100～200mg／L。受酸和酶的作用易分解，使用时要注意。 天然复合物 第37页，共78页，编辑于2022年，星期一 培养基种类 MS培养基 B5培养基 White培养基 N6培养基 KM-8P培养基 基本培养基 二、培养基的类型： 第38页，共78页，编辑于2022年，星期一 N6培养基特点： 成分简单 KNO3 和 (NH4)2SO4含量高 适合花药培养 ★ White培养基特点： 无机盐量较低，适合生根培养 第39页，共78页，编辑于2022年，星期一 B5培养基 特点： 含较低的铵 双子叶植物 尤其木本植物组培可选择 MS培养基特点：无机盐、离子 浓度高，硝酸盐含量较高。 有机成分复杂 用于原生质体培养( 包括原生质融合的培养) KM-8P培养基特点： 第40页，共78页，编辑于2022年，星期一 表1　MS培养基的组成配方 组成成分 数量(mg/L) 组成成分 数量(mg/L) NH4NO3 1650 Na2-EDTA 37.3 KNO3 1900 FeSO4·7H2O 27.8 CaCl2·2H2O 440 CuSO4·5H2O 0.025 MgSO4·7H2O 370 蔗糖 30 KH2PO4 170 pH 5.8 KI 0.83 肌醇 100.0 H3BO3 6.2 烟酸 0.5 MnSO4·4H2O 22.3 盐酸吡哆醇 0.5 ZnSO4·7H2O 8.6 甘氨酸 2.0 Na2MoO4·2H2O 0.25 盐酸硫铵等 0.4 CoCl2·6H2O 0.025 第41页，共78页，编辑于2022年，星期一 表2　B5培养基的组成和配方 组成成分 数量(m