分子生物学基础试验.ppt

整理ppt 四、操作步骤 (一) 培养细菌 将带有质粒pBR322的大肠杆菌接种在含50μg/mL氨苄青霉素(Amp)的LB液体培养基中,37℃振荡培养过夜。注意:添加Amp时,须待LB培养基冷却到50℃左右方可加入。 (二) 从菌落中快速提取制备质粒DNA 1. 取1.4mL菌液置于1.5mL Ep管中,转速10000r/min,离心3min。 2. 弃上清,加入150μL GET缓冲液,充分混匀,在室温下放置10min。 3. 加入200μL新配制的0.2mol/L NaOH(内含1% SDS),加盖,颠倒2~3次,使之混匀,冰上放置4min,最多不能超过5min。 分子生物学基础实验 指导老师:肖靓 分子生物学基础实验 分子生物学实验技术已成为生物化学及分子生物学以及相关学科院系教学科研不可缺少的一部分。为提高学生在分子生物学技术方面的动手能力,分子生物学实验室主要开设常用而基本的分子生物学实验技术。它的内容包括质粒DNA的制备;DNA的重组;PCR基因扩增等等。 实验要求 上课时间与纪律:严格遵守老师的安排。 实验室内禁止饮食、勿高声谈话、随意走动。 课前预习、课中认真操作、课后的实验报告。 妥善保管好每组的实验器具。 实验操作要求人人动手。 值日制度:每天五位同学。 一、? 质粒DNA小量制备的实验原理 要把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进细胞中去

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