河北农业大学免疫学课件第二十二章免疫学检测原理及临床应用详解.pptVIP

第三十页，共四十四页。 免疫胶体金检测技术用于怀孕诊断 （怀孕） （未怀孕） 第三十一页，共四十四页。 河北农业大学免疫学课件第二十二章免疫学检测原理及临床应用详解演示文稿 第一页，共四十四页。 优选河北农业大学免疫学课件第二十二章免疫学检测原理及临床应用 第二页，共四十四页。 目 录 基于抗原-抗体反应的检测方法 免疫细胞检测 免疫分子检测 免疫学诊断与监测 第三页，共四十四页。 第一节 基于抗原-抗体反应的检测方法 抗原与抗体在体内体外均能发生特异性结合反应，因抗体主要来自血清，因此在体外进行的抗原抗体反应又称为血清学反应或免疫血清学技术。 第四页，共四十四页。 一、抗原-抗体反应的特点 1.特异性与交叉性 交叉反应是区分血清型和亚型的重要依据！！ 第五页，共四十四页。 2.抗原-抗体结合的带现象与可见性 第六页，共四十四页。 3. 可逆性 第七页，共四十四页。 4. 反应阶段性 第一阶段：特异性结合阶段 特点：反应快（数秒至数分钟）、无可见反应 第二阶段：反应的可见阶段 特点：反应慢（数分钟至数小时）、表现为凝集、沉淀、补体结合等反应，所受影响因素较多。 第八页，共四十四页。 二、影响抗原抗体结合的因素 电解质：生理盐水、缓冲液 温度：37 或 4 摄氏度 酸碱度：pH值在 6~8 抗原和抗体的性质（抗体特异性和亲和力） 振荡：适当 杂物和异物 第九页，共四十四页。 三、抗原-抗体反应检测方法 反应类型及试验名称 反应类型及试验名称 凝集试验 直接凝集试验 标记抗体技术 免疫荧光抗体技术 间接凝集试验 免疫酶标记技术 乳胶凝集试验 放射免疫测定技术 沉淀试验 絮状沉淀试验 化学发光标记技术 琼脂免疫扩散试验 免疫复合物散射反应 免疫电泳 血清学新技术 免疫传感技术 火箭免疫电泳 免疫印记技术 补体参与的试验 补体结合试验、补体依赖性细胞毒试验、免疫黏附血凝试验 免疫胶体金技术 免疫沉淀技术 免疫核酸 探 针技术 中和试验 病毒 中 和试验 免疫电 镜 技术 毒素 中 和试验 免疫蛋白芯片技术 第十页，共四十四页。 1. 凝集反应 直接凝集 第十一页，共四十四页。 间接凝集 第十二页，共四十四页。 间接凝集抑制试验 第十三页，共四十四页。 协同凝集试验 人血清IgG可与葡萄球菌A蛋白（SPA）结合，将已知特异性抗体IgG结合至SPA, IgG Fab暴露在金黄色葡萄球菌菌体表面，其与相应抗原特异性结合，导致金黄色葡萄球菌凝集。 第十四页，共四十四页。 2. 沉淀反应 单向免疫扩散 双向免疫扩散 第十五页，共四十四页。 双向双扩散沉淀线与抗原成分的关系 第十六页，共四十四页。 免疫电泳 第十七页，共四十四页。 3. 补体参与的反应 溶血空斑试验 第十八页，共四十四页。 4. 免疫标记技术 （1）免疫荧光法 第十九页，共四十四页。 唾液腺中的狂犬病毒 单纯疱疹病毒 第二十页，共四十四页。 （2）酶免疫测定 用酶标记的抗体进行抗原抗体反应。 一般用酶标仪测定光密度值（OD值）以反应抗原或抗体含量。 灵敏度可达 ng ~ pg/ml 水平。 常用标记的酶为辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）等。 第二十一页，共四十四页。 酶联免疫吸附试验（enzyme linked-immunosorbent assay, ELISA）: 将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面，在固相表面经行抗原抗体反应，通过洗涤固相表面抗原抗体复合物与液相中游离成分分离。 第二十二页，共四十四页。 酶标仪 第二十三页，共四十四页。 第二十四页，共四十四页。 第二十五页，共四十四页。 酶联免疫斑点试验（enzyme linked immunospot assay, ELISPOT） 第二十六页，共四十四页。 BAS-ELISA（生物素-亲和素系统ELISA） 第二十七页，共四十四页。 免疫组化技术 第二十八页，共四十四页。 免疫胶体金技术 第二十九页，共四十四页。