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生物化学实验指导 电子版 1 实验一 糖类的颜色反应 3 实验二 糖类的还原作用 4 实验三 蛋白质的颜色反应 6 实验四 蛋白质的沉淀反应 9 实验五 蛋白质等电点测定 11 实验六 酪蛋白的制备 —— 等电点沉淀法 12 实验七 氨基酸的纸层析 14 实验八 电泳技术 —— 纸电泳分离氨基酸 16 实验九 酶的催化特性 20 实验十 糖化酶活力测定 23 实验十一 从酵母提取核糖核酸——稀碱法 25 实验十二 从酵母提取核糖核酸 —— 浓盐法 26 实验十三 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较 29 实验十四 醋酸纤维薄膜电泳 30 2 实验一 糖类的颜色反应 一、实验目的 1．了解糖类某些颜色反应的原理。 2．学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。 二、实验原理 1. -α萘酚反应（ Molisch 反应）原理 糖在浓无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与 α-萘酚 生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性，故此反应不是糖类的特异反 应。 2.间苯二酚反应（ Seliwanoff 反应）原理 在酸作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反 应是酮糖的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较 长时，才呈微弱的阳性反应。在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。 三、器材 1.试管及试管架 2.滴管 3.水浴锅 四、试剂 1.莫氏（ Molisch ）试剂： 5% α-萘酚的酒精溶液，称取 α-萘酚 5g ，溶于 95%酒精中， 并用此酒精使总体积达 100mL ，贮于棕色瓶内。此试剂需新鲜配制。 2.塞氏（ Seliwanoff ）试剂：称取间苯二酚 0.05g 溶于 30 mL 浓盐酸中，再用蒸馏水稀 释至 100 mL ，此试剂需新鲜配制。 3.1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖 1g，溶于 100mL 蒸馏水中。 3 4.1% 果糖溶液：称取果糖 1g，溶于 100mL 蒸馏水中。 5.1%蔗糖溶液：称取蔗糖 1g，溶于 100mL 蒸馏水中。 6.1%淀粉溶液：称取可溶性淀粉 1g 与少量冷蒸馏水混合成薄浆状物，然后缓缓倾入 沸蒸馏水中，边加边搅，最后以沸蒸馏水稀释至 100mL 。 7.0.1%糠醛溶液：称取糠醛 0.1g ，溶于 100mL 蒸馏水中。 8.浓硫酸 500mL 五、操作 1. -α萘酚反应（ Molisch 反应） 取 5 支试管，分别加入 1%葡萄糖溶液、 1%果糖溶液、 1%蔗糖溶液、