水中大肠菌群的含量测定PPT课件.ppt

水中大肠菌群的测定;一、目的要求 ;二、基本原理;1、初发酵试验： 发酵管内装有乳糖蛋白胨液体培养基，并倒置一德汉氏小套管。乳糖能起选择作用，因为很多细菌不能发酵乳糖，而大肠菌群能发酵乳糖产酸产气。为便于观察细菌的产酸情况，培养基内加有溴甲酚紫作为pH指示剂，细菌产酸后，培养基即由原来的紫色变为黄色。溴甲酚紫还可移抑制其他细菌，如对芽胞菌生长的抑制。水样接种于发酵管内，37℃培养24h，小套管中有气体形成，并且培养基浑浊，颜色改变，说明水中存在大???菌群，为阳性结果。但是，有个别其他类型的细菌在此条件下可能产气，而不属于大肠菌群；此外，产酸不产气的发酵管，也不一定是非大肠菌群，因其在量少的情况下，也可能延迟48h后才产气，这两种情况应视为可疑结果，因此，需要继续进行下面的实验，才能确定是否是大肠菌群。48h后仍不产气的为阴性结果。 ;2、平板分离： 伊红美蓝琼脂平板含有伊红和美蓝染料，在此作为指示剂，大肠菌群发酵乳糖造成酸性环境时，该两种染料即结合成复合物，使大肠菌群产生带核心的、有金属光泽的深紫色菌落。 初发酵管24h内产酸产气和48h产酸产气的均需在以上平板划线分离，培养后，将符合大肠菌群菌落特征的菌落进行革兰氏染色，只有染色为革兰氏阴性、无芽胞杆菌的菌落，才是大肠菌群菌落。 ;3、复发酵试验： 将以上两次试