mrna的分离纯化细胞凋亡实验步骤及注意事项phage44.pptxVIP

噬菌体展示技术的原理及应用 (Key words: Phage display) 1、噬菌体展示技术的原理 2、噬菌体展示技术的应用现状 3、噬菌体展示技术应用于水产养殖业 4、展望 一、噬菌体展示技术的原理 PIII 融合蛋白 PIII 基因型 表达型 噬菌体展示技术是将各种多肽或蛋白质以融合蛋白的形式表达并展示在噬菌体表面，同时将其遗传密码包含于噬菌体内部，这使得蛋白质的功能与其基因密码有机的连结在一起。 选择方法： 淘选（Panning) 而不是 筛选（Screening) 非展示系统 展示系统 Solid phase selection with immunotubes B B B B B B Immunotube coated with antigen coated with steptavidin and biotinylated antigen B biotin antigen Solution phase selection with biotinylated antigen Bind to Streptavidin coated microtitre wells Wash to remove unbound phage particles. Elute bound phage Amplify eluted phage Repeat selection Analyze a) ELISA b) Specificity c) Sequencing d) Affinity e) Activity E.coli 感染 和扩增 固相 淘选系统 完整细胞 组织，器官 常规法 淘选方法 正负法 竞争法 噬菌体展示技术最关键的优势有三： 第一，淘选的高效率使得在极低的存在 水平下，挑选到高亲和力噬菌体成为可能； 第二，所挑选到的噬菌体可在微量存在的情况下，通过感染细菌得到富集； 第三：展示的多肽或蛋白质与其包含在噬菌体内部的基因密码的连接，使得结合肽或蛋白质的序列分析既快速又简便。 噬菌体（M13, T7, T4, ) 病毒（反转录病毒，杆状病毒） 表面展示系统 细菌（葡萄球菌，E. Coli) 酵母 体外共价连接（蛋白—DNA, 蛋白—RNA) 诊断 被动免疫 抗体 蛋白质结构分析 药物导航 蛋白质纯化 应用范围： 受体—配体 信息传递 蛋白质—蛋白质 诘抗剂 蛋白质—DNA 抑制剂 蛋白质—其他 多肽 诊断 基因表达控制