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生物化工试题与参考答案 (仅供参考) 1. 简述生物工业下游技术的特点及其重要性. 答:(1)生化分离技术：是对生物界自然产生的或由微生物菌体发酵的、动植物细胞组织培养的、酶反应等各种生物工业生产 过程获得的生物原料，经提取分离、加工并精制目的成分，最终使其成为产品的技术，通常也称为下游技术 (Downstream Processing)或下游工程。该技术是生物技术转化为生产力不可缺少的重要环节，其技术的进步程度对于保持和提高各国在生 物技术领域内的经济竞争力是至关重要的。 (2)特点：生物产品包括传统的生物技术产品(如发酵生产的有机溶剂、氨基酸、抗生素、有机酸)和现代生物技术产品(如基 因工程生产的疫苗、干扰素、活性肽等 )。它们的生产不同于一般的化学品，有其自身的特点： A：发酵液或培养液中欲提 取的生物物质浓度很低 B：培养液是多组分混合物 C：生化物质稳定性差 D 发酵或培养大多是分批操作 E 对最终产品的质量要求很高 (3)重要性：A 生化分离技术是生物产品工业化的必要手段，具有不可取代的地位。生物产品一般是从各种杂质中制备的， 只有经过分离和纯化等下游加工过程才能制得符合使用要求的高纯度产品。B 生化分离的实施十分艰难且需要很大代价。特 稀的水溶液原料和高纯度产物之间的巨大差异造成的。产物稳定性差，导致起回收率不高，如抗生素产品一般要损失 20% 左右。C 分离纯化的方法十分复杂和昂贵，产品成本中，分离与纯化部分占总成本的 40-80%，精细、药用产品更高；生产 过程中，下游加工的人力、物力占全过程的 70%-90%。 2. 简述生物工业下游技术的一般步骤和操作单元。 答：(1)由于工业生物技术产品众多，原料广泛，产品性质多样，用途各异，因而分离与纯化步骤可有不同的组合，提取和 精制的方法也多种多样的，但大多数下游加工过程按生产过程的顺序分为 4 个阶段。A 预处理。B 提取(初步纯化)。C 精制(高 度纯化)。D 成品加工(2)生物工业下游技术的一般步骤和单元操作图解： 发酵液→预处理→细胞分离→细胞破碎→细胞碎片分离 →初步纯化→ 精 制→ 成品加工 加 热 调 pH 絮 凝 过 滤 离 心 匀 浆 研 磨 离 心 沉 淀 结 晶 浓 缩 双水相 膜分离 吸 附 离子交换 无菌过滤 萃 取 色谱分离 干 燥 膜分离 酶解溶胞 3. 简述生物工业下游的选择原则. 超 滤 超 滤 结 晶 电泳 答:(1)采用步骤数最少 : 产品收得率和质量控制是贯穿生物工业下游技术过程的主线。下游技术的步骤越多，提取收得 率也越低。如整个下游过程包括 6 步操作，每步操作的分步收率为 90%，则总收率仅为(0.9)6×100%=53.1%.(2) 采用步 骤的次序要相对合理:在生物技术下游加工过程的四大步骤中，固液分离、精制和成品加工选用技术范围窄，次序不是 问题。而初步纯化时，对于不同特性的产品，具有不同的纯化步骤，通常的顺序是：匀浆(或细胞破碎)、沉淀、离子交 换、亲和吸附、凝胶过滤。(3)产品规格(4)生产规模(5)进料组成(6)产品的稳定性(7)产品的物性：包括溶解度(受 pH、盐 的影响)、分子大小、功能团、稳定性(受 pH 值、温度等影响)、分子电荷(受 pH 影响，对离子交换的选择有影响)、危 害性等(8)分配或连续过程(9)废水 4. 为何要对发酵液进行预处理？预处理发酵液的方法有哪些？ 答:(1)发酵液中杂质很多，不仅影响产品质量和收得率，对后续提取和精制也有很大影响。如高价无机离子对离子交换 能力产生影响；可溶性蛋白在有机溶剂萃取和双水相萃取时易产生乳化现象，影响两相分离。(2)A 降低液体粘度 B 调 pH 值。C 凝聚与絮凝。D 加入惰性助滤剂.E 加入反应剂 5.什么是凝聚和絮凝？它们在发酵液预处理时的作用是什么？ 答：(1)凝聚：在投加的化学物质作用下，由于胶粒之间双电层电排斥作用降低，电位下降，胶体脱稳使粒子相互聚集 成 1mm 大小的聚集体的过程。絮凝：使用某些高分子絮凝剂将胶体粒子交联成网，形成较大(10mm)絮凝团的过程。其 中絮凝剂主要起架桥作用。(2)它们是目前工业上最常用的预处理方法之一。此法将化学药剂预先投加到悬浮液中，改 变细胞、细胞碎片、蛋白质等胶体离子的分散状态，破坏其稳定性，使它们聚结成可分离的絮凝体以便分离。 6. 如何去除发酵液中的杂蛋白？ 答：一、沉淀法：(1)等电点沉淀(不完全)：利用蛋白质是两性电解质的特点，其在等电点溶解度最小的原理。(2)盐析：在酸 1 性溶液中与阴离子如三氯乙酸盐、水杨酸盐、鞣酸盐、过氯酸盐等形成沉淀；在碱性溶液中与阳离子如Ag , Cu , Fe , Pb + 2+ 3+ 2+ 等形成沉淀。 二、变性法。(1)加热法：最常用；不仅使蛋白质变性，