CXCR4VEGF在原发性睾丸淋巴瘤中的表达水平及临床意义.docVIP

CXCR4VEGF在原发性睾丸淋巴瘤中的表达水平及临床意义 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：CXCR4VEGF在原发性睾丸淋巴瘤中的表达水平及临床意义 1 1、资料与方法 2 2、结果 3 3、讨论 5 文2：巨噬细胞移动抑制因子在原发性肝癌中的临床意义 7 1 材料和方法 7 2 结 果 8 3 讨 论 9 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 CXCR4VEGF在原发性睾丸淋巴瘤中的表达水平及临床意义 文1：CXCR4VEGF在原发性睾丸淋巴瘤中的表达水平及临床意义 原发性睾丸淋巴瘤(PTL)是一种易中枢神经系统浸润、肿瘤相关致死率高的肿瘤，预后较差[1]。目前临床上缺少早期预测PTL中枢神经系统浸润的指标，这也长期制约着原发性睾丸淋巴瘤的治疗进展与患者的预后[2]。以往的研究提示趋化因子受体CXCR4与血管内皮生长因子VEGF的表达水平可能与淋巴瘤的中枢神经系统浸润有关[3，4]，因此本研究运用了免疫组化方法对PTL患者的组织切片中两种蛋白表达水平进行了检测，并且探讨了CXCR4和VEGF与PTL患者预后之间的关系。 1、资料与方法 一般资料 59例原发性睾丸淋巴瘤组织选自哈尔滨医科大学附属肿瘤医院2000年1月—2015年12月手术切除标本或穿刺病理标本，且均已签署知情同意书，病理类型经病理科医生确诊均为非霍奇金弥漫性大B细胞淋巴瘤。确诊前均未接受化疗、放疗或其它抗肿瘤治疗。患者均为男性，年龄32～85岁，中位年龄54岁;组织学分类中生发中心来源(GCB)10例，非生发中心来源(Non-GCB)49例;临床病理相关资料包括年龄、部位、病理类型、ECOG评分、血清乳酸脱氢酶(LDH)、β2微球蛋白、Ki67(结果来自本院病理报告)、淋巴结外累及情况、淋巴瘤国际预后指数(Internationalprognosticindex，IPI)评分、AnnArbor分期、治疗方法、是否完全缓解(Completerremission，CR)、复发转移时间、部位及生存情况。 研究方法及结果判定 光学显微镜及照相系统购自上海Olymous公司，TEC-2601型摊片机购自常州市郝思林医用仪器有限公司，切片机购自德国Microm公司，切片盒购自哈尔滨市博润生物技术公司，恒温干燥箱购自上海福玛实验设备有限公司。兔抗人单克隆CXCR4抗体[UMB2](Ab124824，dilution1∶100，Cambridge，UK)、鼠抗人单克隆VEGF抗体[VG-1](Ab1316，dilution1∶200，Cambridge，UK)购自Abcam公司，增强型二步法检测试剂盒、DAB显色剂、PBS磷酸盐缓冲、免疫组化S-P试剂盒、中性树胶等购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 免疫组织化学具体操作流程严格按照试剂盒说明进行，以已知阳性切片做阳性对照(试剂公司提供)，磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗做阴性对照。采用Olympus显微镜观察组织切片染色情况。CXCR4及VEGF蛋白主要定位于细胞质，胞质内出现黄色、棕黄色或者褐色颗粒的细胞记为阳性细胞。随机选择10个高倍镜视野，将染色强度评分与阳性细胞百分比评分相乘为综合评分:(1)根据阳性细胞染色强度评分:无色为0分，淡黄色为1分，棕色为2分，棕褐色为3分;(2)根据阳性细胞百分比进行评分:75%为4分;(3)将阳性细胞比例与染色强度相乘结果为:≥6分为阳性，6分为阴性。 统计学方法 采用SPSS统计软件版本对数据进行统计分析。CXCR4、VEGF与临床病理因素的关系采用χ2检验分析;应用Kaplan-Meier方法对CX-CR4、VEGF表达情况进行生存分析;应用Cox回归模型进行预后分析;P表示差异具有统计学意义。 2、结果 和VEGF的表达水平 CXCR4及VEGF蛋白在原发性睾丸淋巴瘤患者组织细胞中均有表达，但主要出现在细胞质中。59例PTL患者中，有31例患者CXCR4蛋白表达阳性(%)，21例患者VEGF蛋白表达阳性(%)(图1) 图1CXCR4和VEGF阳性表达情况 和VEGF的表达与原发性睾丸淋巴瘤患者临床病理特征的关系 CXCR4蛋白的表达与AnnArbor分期、IPI评分、血清LDH水平、Ki67密切相关。CXCR4蛋白随患者AnnArbor分期的增加表达增强( VEGF蛋白的表达与AnnArbor分期、IPI评分、B症状、血清LDH水平、是否复发、CR状态密切相关。VEGF蛋白随患者AnnArbor分期的增加表达增多(P=);IPI评分高的患者VEGF蛋白表达增加()(表1) 表1原发性睾丸淋巴瘤的临床病理特征及与CXCR4、VE