探讨普通小球藻生化组成与光合生理在不同CO2浓度下的响应.docVIP

探讨普通小球藻生化组成与光合生理在不同CO2浓度下的响应 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：探讨普通小球藻生化组成与光合生理在不同CO2浓度下的响应 1 1、实验部分 2 2、结果与讨论 5 3、结论 9 文2：不同磷浓度下氮磷比对小球藻生长的影响 10 1 材料与方法 11 2 结果与分析 12 参考文摘引言： 13 原创性声明（模板） 14 文章致谢（模板） 15 正文 探讨普通小球藻生化组成与光合生理在不同CO2浓度下的响应 文1：探讨普通小球藻生化组成与光合生理在不同CO2浓度下的响应 普通小球藻是真核生物，隶属于植物界;绿藻门;共球藻纲或四胞藻纲;小球藻目;小球藻科;小球藻属。普通小球藻是小球藻的一种，属于淡水藻，具有生长速度快，蛋白、油脂、色素等营养成分丰富，易于人工培养，生态分布广等特点，成为近年来CO2减排和生物能源研究的热点之一[1]。近年来，由于温室气体CO2的持续过量排放，导致大气中CO2浓度加速上升，预计到2100年将增加到1000μatm(1atm=×105Pa)[2]。大气中的CO2会经过水汽界面与水体发生交换，约有1/3会被水体吸收。因此，随着大气中CO2浓度的加速上升，水体中的CO2含量也将迅速增加，导致水体pH下降，引发水体酸化现象。普通小球藻等微藻是重要的初级生产力和食物链流动的基础环节，水体中碳酸盐体系的变化将对它们的生长、光合和生化组成等生理过程造成影响，进而随食物链流动影响到整个水体生态系统[3，4]。早期研究就发现，CO2浓度变化会对小球藻的生理产生影响。陆贻超等[5]研究了小球藻在空气CO2浓度与高CO2浓度下生长和重要生化组成的变化，结果发现小球藻的生长速率、细胞密度、干物质总量在高CO2浓度下相对较高。QIU等[6]也发现，pH值降低时，小球藻生物量的积累增加，而蛋白质的含量减少，细胞内n(C)(N)比例上升。然而，将CO2浓度逐级升高并且对小球藻的生长、光合、生化组成方面进行全面监测的研究还相对较少。为更好更全面地了解普通小球藻应对不同CO2浓度的生理响应，本研究将CO2浓度分为5个梯度(400，700，1000，1500，2000μatm)，分别代表着当前(400μatm)、本世纪中期(700μatm)[7]、本世纪末(1000μatm)[2]以及未来(1500，2000μatm)的CO2浓度，对普通小球藻的生长、光合、生化组成(可溶性糖、总蛋白、色素、总酚、油脂、n(C)(N))的变化趋势和不同梯度的显著性差异进行了比较分析，从而有助于预测环境变化对小球藻生理生化的影响。 1、实验部分 藻种及培养条件 普通小球藻藻种来自黄海水产研究所藻种室。普通小球藻的培养基为改良后的BG11[5]，光照强度为120μmol·(m2·s)-1，20℃下，以12h/12h的光/暗周期培养，每天早晚手动摇藻，待到指数生长期进行后期实验。 实验条件的设定 取适量处于指数生长期的普通小球藻悬浮液，离心(3000r·min-1，5min)，用新鲜培养基重悬浮，使其OD值约为，此时藻体密度基本可达到每毫升×105个细胞。将上述新鲜藻液以相同接种量接种到5瓶新鲜培养基中(每瓶藻液初始细胞数大概为每毫升×105个细胞)，分别放入CO2浓度为400，700，1000，1500，2000μatm的植物培养箱中，连续通气，每天早、中、晚各摇动一次。5个培养箱中分别放入200mL的LBG11培养基，通气24h测其pH值，实验过程中每天测定一次，使其处于正常范围(表1) 表1各CO2浓度梯度pH值范围导出到EXCEL 生长曲线的测定 分别取5个CO2浓度梯度的藻液2mL，从第0d开始到第16d隔天取样，用紫外分光光度计测定波长680nm处OD值，以400μatm下藻液作为对照组。 叶绿素荧光参数的测定 叶绿素荧光参数的检测采用Dual-PAM-100叶绿素荧光仪。测定前将荧光仪进行预调试，光化光设为120μmol·(m2·s)-1，藻液暗适应15min后进行荧光参数的测定。弱测量光下测得初始荧光F0，暗适应后的藻液在饱和荧光脉冲下测得最大荧光(Fm)。光化光打开，藻液进行光合作用，光照样品获得最大荧光值Fm，根据上述所得荧光值计算藻细胞PSⅡ的最大光化学效率和实际光化学效率[8] 叶绿素和类胡萝卜素的测定 分别取2mL各梯度藻液离心(4℃，3000r·min-1，5min)，弃上清，加入2mL95%的乙醇，摇匀，放置4℃黑暗中静置12h以上。静置后的萃取液离心(4℃，3000r·min-1，5min)，取上清液[9]，分别在波长，.0测定各样品的吸光度值。计算叶绿素和类胡萝卜素的含量[10] Ca=××，(