第八章基因工程与体外表达.pptVIP

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  • 2022-06-08 发布于重庆
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(二)药物筛选转染细胞 哺乳动物细胞中最常用的选择性标记物中包括有细菌新霉素抗性基因(neor)。此基因具有对氨基糖苷抗生素G-418(新霉素衍生物)的抗性。G-418是用于阻断细胞内的蛋白质合成,从而达到杀伤真核细胞的目的。如果将带有neor基因的质粒导入细胞,并在含有G-418的培养基中培养,未转染的细胞被杀死,而存活的细胞便是转染细胞。 * 第六十三页,共一百零一页。 第五节 基因的改造 (一 )寡核苷酸介导的定点诱变法的建立 (二)含U模板法 (三)PCR定点诱变法 * 第六十四页,共一百零一页。 寡核苷酸介导的 诱变方法的基本原理: * 第六十五页,共一百零一页。 含U模板法 * 第六十六页,共一百零一页。 PCR介导的 定点诱变法 * 第六十七页,共一百零一页。 第六节 克隆基因的表达 ? 基因工程的主要目的之一,就是要制备大量有用的蛋白质和多肽,尤其是人体蛋白。得到了克隆的基因或cDNA后,按照正确的方向插入表达载体,连在启动子的后面,导入相应的宿主细胞,即可进行表达。在不同的表达系统中,其表达方式不尽相同。 * 第六十八页,共一百零一页。 真核生物结构基因示意图 真核生物基因的结构特点 * 第六十九页,共一百零一页。 原核生物基因的结构特点 基因

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