代谢物识别与结构鉴定.pptVIP

二、放射性示踪 第二十九张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 放射性同位素示踪技术是利用放射性核素及其标记物作为示踪剂来研究生物体内各种物质吸收、分布、代谢、排泄( ADME) 规律的一门科学。 第三十张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 第一张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 代谢物的结构鉴定在新药开发过程的重要地位 预防潜在的毒性 测定是否和原药具有相同的治疗作用 测定对其他治疗有内在的活性 测定是否有代谢物和已知药物相关 第二张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 药物代谢研究贯穿于创新药物研发产业链的始终，并在药物的发现及开发过程中起到越来越重要的作用。建立可靠的分析方法是研究药物体内代谢的前提。在药物发现和开发的许多阶段，代谢物鉴定具有关键性作用。 极性代谢物的分离和保留 怎样在复杂的数据中准确快速地找到代谢物 怎样对代谢物的结构进行确认，怎样确定代谢位点 A C B 第三张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 联用技术 放射性示踪 第四张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 一、.联用技术 第五张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 联用技术 LC-MS LC-MS/MS GC-MS GC-MS/MS LC-NMR 第六张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 LC-MS联用技术 体内代谢物研究过程中，因待测物浓度太低，提取其纯品进行结构鉴定是不太可能的。应用LC-MS联用技术可获得复杂混合体中单一成分的质谱图，大大有利与药物代谢物的分离与鉴定。 第七张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 LC-MS联用技术 随着现代色谱联用技术的发展，体内多种微量代谢产物的分离、鉴定已成为一个连续过程，尤其是LC-MS样品前处理简单，一般不要求水解或衍生化处理，可直接用于药物及其I，Ⅱ相等极性较大代谢产物的同时分离、鉴定。运用LC-MS技术不仅可避免复杂烦琐的分离、纯化代谢产物的工作，而且可分离鉴定难以辨识的体内痕量代谢产物。 第八张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 LC-MS联用技术 四极质谱仪（QMS） 三重四极质谱仪（TQMS） 四极-线性离子阱质谱仪（QTrap） 四极-飞行时间质谱仪（Q-TOFMS） 离子阱-飞行时间质谱仪（IT-TOFMS） 代谢物鉴定中， 常用的与LC 联用的质谱仪器 第九张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 LC-MS特点 样品前处理简单，无需衍生化，适用范围广 将色谱的高分离能力与质谱的高检测灵敏度、定性专属性集于一身 随着接口装置和离子化技术的发展成熟，该技术在体内药物分析中逐渐发展成为一种常规的分离检测方法 第十张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 实例 大鼠尿中人参皂苷 Rd及 其代谢物的 LC-MS研究 第十一张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 LC-MS实例 目的：探讨人参皂苷 Rd在大鼠体内的代谢产物及转化途径。 方法：选择 SD大鼠 6只 ,单剂量口服和静脉给予人参皂苷 Rd,分段收集给药前和给药后 0～24 h尿样 ,将尿样分时段合并后采用旋转薄膜蒸发浓缩 ,以固相萃取小柱纯化处理 ,采用高效液相色谱 -串联飞行时间质谱进行检测。 结果：通过比较给药前后的 TOF总离子流图 ,对尿中推测的代谢物和标准物质的出峰时间及相关化合物选择离子扫描二级质谱图进行了比较分析 ,结果在尿中发现了 7种代谢产物 ,系统分析了这些代谢产物的代谢转化规律及可能结构。 结论：大鼠尿中人参皂苷 Rd的主要转化途径为氧化、水解、结合及异构化代谢反应。 第十二张，课件共三十六张，编辑于2022年5月 离子源(ESI)电压: - 4 kV, 去簇电势(DP) :- 15 V, 聚焦电势( FP) : - 80 V, 去簇电势2 (DP2) :- 15 V, 雾化气(NEB ) : 0135 L ·min- 1 帘气(CUR) : 0120 L·min-1 负离子方式检测 采用TOF扫描一级质谱 扫描质量范围: 400～1 200 选择离子扫描二级质谱进行测定 色谱柱 流动相 其他 质谱条件 色谱与质谱条件 为甲醇(A) -10 mol·L - 1乙酸铵(B) 40 min内由体积比50∶50 线性梯度升至90 ∶10, 40 ～55 min 维持A∶B = 90∶10,等度洗脱15 min 流速: 018 mL·min-1 分流比为1 ∶60 柱温为25 ℃, 进样量为20μL Agilent Zorbax SBC18 (150 mm ×416 mm, 5 μm) Agilent Zorbax SB C18 (1215 mm ×211 mm)预柱 LC-MS实例 第十三张，课件共三十六张，编辑于2022年5