代谢调节与代谢工程.pptVIP

3.四碳二羧酸的来源 Δ在生产菌中检出CO2固定反应酶活性 磷酸烯醇丙酮酸(PEF)羧化酶和苹果酸酶 谷氨酸对糖的转化率达到81.7% Δ DCA循环 标志酶：异柠檬酸裂解酶 在谷氨酸发酵中，DCA环一方面可以作为TCA循环有缺陷时C4二羧酸的补充 在谷氨基酸生产菌的生长中提供能量 作用 谷氨酸生成期中要封闭DCA环？ 通过DCA环提供C4二羧酸时谷氨酸对糖的转化率仅为54.4% 第三十一张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 4.异柠檬酸脱氢酶活力强 提供NADPH,用于还原α-酮戊二酸生成谷氨酸，形成氧化还原共扼体系 5.氨的导入 合成谷氨酸的反应有3种： α-酮戊二酸 + NH4+ NADPH + 谷氨酸 H2O NADP + + 谷氨酸脱氢酶 α-酮戊二酸 + 天冬氨酸或丙氨酸 谷氨酸转氨酶 谷氨酸 α-酮戊二酸 + α-酮戊二酸 + 谷氨酰胺 NADPH + 2谷氨酸 NADP + 谷氨酸合成酶 第三十二张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 生产菌中 谷氨酸转氨酶活力低，转氨作用可以不考虑 谷氨酸合成酶由于不受高浓度谷氨酸抑制，其作用值得重视 谷氨酸脱氢酶是合成积累谷氨酸的主要酶 氨的导入时 生物素缺乏， NH4+影响糖代谢速度：提高糖代谢速度 高效合成谷氨酸 生物素充足时， NH4+不影响糖代谢速度 6.谷氨酸合成的调节机制 谷aa比天冬aa优先合成 谷aa脱氢酶 谷aa对其反馈抑制和反馈阻遏 柠檬酸合成酶 TCA的关键酶，受能荷调节，谷aa反馈阻遏，乌头酸反馈抑制 异柠檬酸脱氢酶 α-酮戊二酸反馈抑制 α-酮戊二酸脱氢酶先天丧失或微弱 PEP受天冬aa反馈抑制，受谷aa和天冬 aa反馈阻遏 第三十三张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 7.细胞膜通透性控制 第三十四张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 第一张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 (1)同功酶调节——isoenzyme 定义：催化相同的生化反应，而酶分子结构有差别的一组酶。 意义：在一个分支代谢途径中，如果在分支点以前的一个较早的反应是由几个同功酶催化时，则分支代谢的几个最终产物往往分别对这几个同功酶发生抑制作用。———某一产物过量仅抑制相应酶活，对其他产物没影响。 举例：大肠杆菌的天冬氨酸族氨基酸合成的调节 第二张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 第三张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 (2)协同反馈抑制 定义：分支代谢途径中几个末端产物同时过量时才能抑制共同途径中的第一个酶的一种反馈调节方式。 举例：谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum） 多粘芽孢杆菌（Bacillus polymyxa） 天冬氨酸族氨基酸合成中天冬氨酸激酶受赖氨酸和苏氨酸的协同反馈抑制和阻遏。 第四张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 天冬氨酸 E,R 4-磷酸天冬氨酸 E 天冬氨酸半醛 E,R E 二氢吡啶二羧酸 同型丝氨酸 同型丝氨酸磷酸 E,R R O-琥珀酰同型丝氨酸 苏氨酸 E,R 六氢吡啶二羧酸 胱硫醚 2-酮丁酸 R 二氨基庚二酸 同型半胱氨酸 R 赖氨酸 甲硫氨酸 异亮氨酸 天冬氨酸族（谷氨酸棒杆菌） 第五张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 第六张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 合作反馈抑制 定义：两种末端产物同时存在时，共同的反馈抑制作用大于二者单独作用之和。 举例：在嘌呤核苷酸合成中，磷酸核糖焦磷酸酶受AMP和GMP （和IMP）的合作反馈抑制，二者共同存在时，可以完全抑制该酶的活性。而二者单独过量时，分别抑制其活性的70%和10%。 第七张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 (3)积累反馈抑制 定义：每一分支途径末端产物按一定百分比单独抑制共同途径中前面的酶，所以当几种末端产物共同存在时它们的抑制作用是积累的，各末端产物之间既无协同效应，亦无拮抗作用。 第八张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 Try 16% CTP 14% 氨甲酰磷酸 13% AMP 41% …… 积累反馈抑制——E.coli谷氨酰胺合成酶的调节 第九张，课件共四十三张，编辑于2022年5月 (4) 顺序反馈抑制 一种终产物的积累,导致前一中间产物的积累，通过后者反馈抑制合成途径关键酶的活性，使合成终止。 举例：枯草芽孢杆菌芳香族氨基酸合成的调节 第十张，课件共四十三张，编辑于2022年