维生素B的分子荧光测定精.pptxVIP

会计学;三、实验步骤; 2.样品溶液制备 称取50g新鲜蔬菜，加40mL水压汁，将菜汁加入20mL1mol.L-1HCl和10mL水煮沸1h，冷却，不断搅拌滴加2mol.L-1NaOH，调节pH为6，再用稀HCl调节pH至4.5，过滤，用水洗涤样品，洗涤液和过滤液合并定量转移至100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。; 3.工作曲线绘制 取标准系列溶液之一，试验实验条件，找出最佳荧光发射波长。在所确定的波长条件下测定标准系列溶液的荧光强度，绘制荧光强度与浓度的工作曲线。 4.测定 分别吸取10.00mL样品溶液三份，依次置于三只25.00mL容量瓶中，加入1.25mL冰醋酸，再加入KMnO4溶液(3%)0.5mL，放置2min，边摇边滴H2O2(30%)，使KMnO4刚好褪色，用纯水稀释至刻度，在荧光光度计上分别测定其荧光强 ; 四、结果处理 1.在坐标纸上绘制If~C的工作曲线 2.根据测定的If.x，从工作曲线上查出溶液中维生素VB2的Cx（mg/L） 3.由下式计算出样品（新鲜蔬菜）中的维生素VB2的含量（mg/100g） VB2 （mg/100g）= Cx ×25.00×10-3 × （100/10）×（1/WS）×100; 五、