代谢调节与代谢工程优秀课件.pptVIP

1.谷氨酸生产菌中存在2个糖酵解途径EMP/HMP 生物素参与糖代谢作用：增加糖代谢的速度 而丙酮酸氧化脱羧的速度未改变 丙酮酸积累 乳酸积累 2.α-酮戊二酸脱氢酶缺失 TCA环阻断， α-酮戊二酸积累 第三十一张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 3.四碳二羧酸的来源 Δ在生产菌中检出CO2固定反应酶活性 磷酸烯醇丙酮酸(PEF)羧化酶和苹果酸酶 谷氨酸对糖的转化率达到81.7% Δ DCA循环 标志酶：异柠檬酸裂解酶 在谷氨酸发酵中，DCA环一方面可以作为TCA循环有缺陷时C4二羧酸的补充 在谷氨基酸生产菌的生长中提供能量 作用 谷氨酸生成期中要封闭DCA环？ 通过DCA环提供C4二羧酸时谷氨酸对糖的转化率仅为54.4% 第三十二张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 4.异柠檬酸脱氢酶活力强 提供NADPH,用于还原α-酮戊二酸生成谷氨酸，形成氧化还原共扼体系 5.氨的导入 合成谷氨酸的反应有3种： α-酮戊二酸 + NH4+ NADPH + 谷氨酸 H2O NADP + + 谷氨酸脱氢酶 α-酮戊二酸 + 天冬氨酸或丙氨酸 谷氨酸转氨酶 谷氨酸 α-酮戊二酸 + α-酮戊二酸 + 谷氨酰胺 NADPH + 2谷氨酸 NADP + 谷氨酸合成酶 第三十三张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 生产菌中 谷氨酸转氨酶活力低，转氨作用可以不考虑 谷氨酸合成酶由于不受高浓度谷氨酸抑制，其作用值得重视 谷氨酸脱氢酶是合成积累谷氨酸的主要酶 氨的导入时 生物素缺乏， NH4+影响糖代谢速度：提高糖代谢速度 高效合成谷氨酸 生物素充足时， NH4+不影响糖代谢速度 6.谷氨酸合成的调节机制 谷aa比天冬aa优先合成 谷aa脱氢酶 谷aa对其反馈抑制和反馈阻遏 柠檬酸合成酶 TCA的关键酶，受能荷调节，谷aa反馈阻遏，乌头酸反馈抑制 异柠檬酸脱氢酶 α-酮戊二酸反馈抑制 α-酮戊二酸脱氢酶先天丧失或微弱 PEP受天冬aa反馈抑制，受谷aa和天冬 aa反馈阻遏 第三十四张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 7.细胞膜通透性控制 第三十五张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 生物素 阻断脂肪酸的合成 影响细胞膜的合成 表面活性剂 对生物素有拮抗 阻断脂肪酸的合成 影响细胞膜的合成 在对数生长期添加青霉素 抑制细胞壁合成 细胞膜损伤 甘油缺陷型 磷脂的合成受阻 影响细胞膜的合成 油酸缺陷型 阻断不饱和脂肪酸的合成 影响细胞膜的合成 第三十六张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 三磷酸腺苷(ATP)是为许多反应提供能量的高能磷酸化物,细胞中的ATP、ADP和AMP含量处于相对平衡的状态——细胞中的能量状态 3.2.5.3能荷（Energy charge） 能荷（Energy charge）来表示细胞中的能量状态。能荷（EC）可用下式来表示： 系统中只有ATP时，EC值为1；只有AMP时，EC值等于0。 第三十七张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 第一张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 1.直线式代谢途径中的反馈抑制： 苏氨酸脱氨酶 苏氨酸 α-酮丁酸 异亮氨酸 反馈抑制 其它实例：谷氨酸棒杆菌的精氨酸合成 2.分支代谢途径中的反馈抑制： 在分支代谢途径中，反馈抑制的情况较为复杂，为了避免在一个分支上的产物过多时不致同时影响另一分支上产物的供应，微生物发展出多种调节方式。主要有： 同功酶的调节， 顺序反馈，协同反馈，积累反馈调节等。 3.2.3 反馈抑制的类型 第二张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 (1)同功酶调节——isoenzyme 定义：催化相同的生化反应，而酶分子结构有差别的一组酶。 意义：在一个分支代谢途径中，如果在分支点以前的一个较早的反应是由几个同功酶催化时，则分支代谢的几个最终产物往往分别对这几个同功酶发生抑制作用。———某一产物过量仅抑制相应酶活，对其他产物没影响。 举例：大肠杆菌的天冬氨酸族氨基酸合成的调节 第三张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 第四张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 (2)协同反馈抑制 定义：分支代谢途径中几个末端产物同时过量时才能抑制共同途径中的第一个酶的一种反馈调节方式。 举例：谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum） 多粘芽孢杆菌（Bacillus polymyxa） 天冬氨酸族氨基酸合成中天冬氨酸激酶受赖氨酸和苏氨酸的协同反馈抑制和阻遏。 第五张，课件共四十七张，编辑于2022年5月 天冬氨酸 E,R 4-磷酸天冬氨酸 E 天冬氨酸半醛 E,R E 二氢吡啶二羧酸 同型丝氨酸 同型丝氨酸磷酸 E,R