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现代中药制剂教育部重点实验室标准操作规程
Key Laboratory of Modern Preparation of TCM, Ministry of Education
Agilent 1200型高效液相色谱仪乙操作规程
文件编码:SOP-ZDSYS-Y-F011
版本号: 01
页 码: PAGE 1/2
制 定 人:严志宏
审 核 人:杨武亮
批 准 人:杨明
颁发部门:
制定日期:2006.8.10
审核日期:2006.9.10
批准日期:2006.10.1
生效日期:2006.10.1
分发部门:各学术方向实验室
关 键 词: 高效液相 操作规程 流动相配比
目 的:制定Agilent 1200型高效液相色谱仪使用标准操作规程,确保操作的规范性、正确性。
适用范围:本标准适用于Agilent 1200型高效液相色谱仪的使用、维护保养及清洁。
责 任:保证维护仪器正常运转及其附件的完整
主体内容:
1、开机前准备
1.1 检查桌面是否清洁、整齐。
1.2 检查设备是否清洁,连接管线是否正常。
1.3 检查电源线有无破损。
1.4 接通电源,检查插座上各插孔的指示灯是否显示正常。
1.5 准备好超声过的流动相和流路冲洗溶剂。准备好10%的异丙醇溶液做sealwash。
2、开机
2.1 撤下设备停用卡,换上设备运行卡。
2.2 运行检查,打开电脑,
2.3 打开仪器各部件开关,开sealwash,待机器自检,核实无异常。并打开软件。
2.4 拧松泵头上的purge快速冲阀(1圈左右),排你需要走的每个流路的气泡,每个约2至5分钟左右。然后,拧紧快速冲洗阀。(不要拧的太紧)
做好仪器运行前的检查,如实填写检查情况,如有问题及时向仪器管理员报告并记录。否则后果有当前实验人负责。
2.5 换上色谱柱用色谱纯的甲醇或乙腈冲洗流路约40分钟左右。若流动相中有盐或酸,再用95%水(加5%甲醇)冲洗约40分钟。
2.6 换上流动相冲洗流路,待基线和压力稳定后,开始分析样品。
2.7 样品分析完后,处理数据。
Agilent 1200型高效液相色谱仪乙操作规程
文件编码:SOP-ZDSYS-Y-F011
版本号: 01
页 码: 2/2
2.8 若流动相中有缓冲盐或酸,用95%水冲洗60分钟左右。
2.9 换上甲醇冲洗流路约30分钟。
3、关机
3.1 把泵的流速设为0ml/min,再依次关闭各仪器模块,关闭Online软件,
关闭仪器各部件上的电源开关,并关闭电脑。
3.2 拔掉机器电源插头。
4、清洁程序
4.1 停机并切断机器电源。
4.2 松开仪器上各活动面板,用无水酒精定期插洗仪器表面的灰尘和污垢。
4.3 定期清洗溶剂瓶中的溶剂过滤头。
4.4 用干净、无纤维抹布擦拭机器,使机体表面光亮清洁,无污迹水渍,机身各部位无污物残留。
5、安全及操作注意事项
5.1 流动相冲洗用的水,必须是重蒸水或二次蒸馏水,并用0.22微米的微孔滤膜过滤,实验完后,倒去水,换上甲醇5ml/min,purge3分钟,防止长细菌堵塞仪器管路。
5.2 操作有机溶剂时一律戴一次性手套。
5.3 流动相中有盐或酸时,在流动相冲洗前后一定要用水冲洗流路,防止柱效下降、堵塞或柱塌陷。
5.4 仪器使用前后一定要用甲醇或乙腈冲洗流路,平衡色谱柱,赶走管路中的杂质和水分。
5.5 流动相禁止使用氯仿、三氯(代)苯、亚甲基氯、四氢呋喃、甲苯等;慎重使用四氯化碳、乙醚、异丙醚、酮、甲基环己胺等,以免造成对柱塞密封圈的腐蚀。
5.6 仪器长期不用时,应用甲醇冲洗各流路。
5.7 检测器的紫外或可见灯在开的情况下,一定要保证有液相流经检测池。若不需要做样,可设置一个较低的流速(如0.05ml/min)。
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