FLD荧光检测器操作规程.docVIP

现代中药制剂教育部重点实验室标准操作规程 Key Laboratory of Modern Preparation of TCM, Ministry of Education FLD荧光检测器操作规程 文件编码:SOP-ZDSYS-Y-F011 版本号：　　　01 页 码： PAGE 1/2 制 定 人：严志宏 审 核 人：杨武亮 批 准 人：杨明 颁发部门： 制定日期：2006.8.10 审核日期：2006.9.10 批准日期：2006.10.1 生效日期：2006.10.1 分发部门：各学术方向实验室 关 键 词： FLD荧光检测器 操作规程 流动相 目 的：制定FLD荧光检测器操作规程使用标准操作规程，确保操作的规范性、正确性。 适用范围：本标准适用于FLD荧光检测器操作规程的使用、维护保养及清洁。 责 任：保证维护仪器正常运转及其附件的完整 主体内容： 1、开机前检查 1.1 检查桌面是否清洁、整齐。 1.2 检查设备是否清洁，连接管线是否正常。（连接方法见3.1） 1.3 检查电源线有无破损。 1.4 接通ＵＰＳ电源，检查插座上各插孔的指示灯是否显示正常。 1.5 撤下设备停用卡，换上设备运行卡。 2、操作要求 2.1 流动相，样品需要用0.22μm的膜过滤。流动相配制要用色谱纯水（≥18MΩ），流动相过滤完要脱气。 2.2 使用荧光纯试剂。 2.3 装流动相的溶剂瓶一定要清洗干净。 3、启动检测器前 3.1 启动检测器前，流路不经过荧光检测器，直接接入废液。甲醇冲洗至少15分钟; 3.2 设定正常的pmt值，大多数为10 ； 3.3 使用适当的响应时间：大多数设4s； 3.4 寻找最佳波长：大多数荧光化合物在230nm处有吸收（线性扫描发射光谱设定测定时的发射波长 多一激发模式 确定最佳的激发波长）； 3.5 评估正确的荧光光谱，它是选择一个峰极大处的光谱并在变曲点处找一个参比点来得到； FLD荧光检测器操作规程 文件编码:SOP-ZDSYS-Y-F011 版本号：　　　01 页 码： 2/2 3.6 在进行分析时开氙灯（荧光检测器在通电几秒钟后可达到平衡）； 3.7 为了更好的重复性和线性，一定把灯设为on，建议仪器开始加温1h； 3.8 　不要让石英流通池超压，在增加另外的设备，如检测器式流分收集器时，不要让石英流通池的压力超过20bar，最好把uv检测器放在荧光检测器之前。注意荧光检测器的出口管线不要被压住！ 4、启动检测器 4.1 检测器通电 4.2 打开氙灯（进行内部检查，大约需要5分钟） 4.3 现在可以改变检测器的设定 FLD 激发/发射 波长 EX=246nm EM=317nm FLD PMT增益 PMT=10 FLD响应时间 4s 增加激发波长 ： B260 C250 D 4.4 通过等吸收图观察最大值 ５、实验完后的验收 为保证蒸发光检测器的正常使用情况，我们需要对仪器使用前后的状态进行检测验收，验收内容：Agilent1200液相实验前后Purge的压力情况和荧光检测器是否正常工作。验收应该由实验人员和实验管理人员（陈立）共同完成。如超出正常上班时间或实验很晚实验管理员不在时，第二天上班时再一起验收。最后由实验管理人员证实签字，才能表明仪器使用正常。 清洁程序和安全及操作注意事项 按照Agilent1200高效液相的操作规程进行