6章DNA重组培训资料课件.pptVIP

第三十页，共五十八页。 图6-11 λ噬菌体的位点特异性整合 整合宿主因子：Integration Host Factor，IHF 第三十一页，共五十八页。 图6-12 λ噬菌体重组整合或切除时切点的序列 第三十二页，共五十八页。 图6-13 酪氨酸重组酶的作用机制 2条DNA链如何整合连接？ 第三十三页，共五十八页。 图4-19 DNA拓扑异构酶的催化的转酯反应 第三十四页，共五十八页。 在att位点的整合和切离并不涉及反应序列的同源部分。整合需识别att P和att B；而切离时需要att L和att R。 整合和切离这两个反应所依赖的蛋白不完全相同。整合（att B ×att P）反应需要噬菌体Int酶（Integrase，Int）和宿主的整合因子（integration host factor, IHF）。切离（att L × att R）反应需要噬菌体Xis，Fis基因的产物以及Int和IHF蛋白的参与。两个反应都需要Int和IHF，而Xis在控制方向上起到重要的作用。它是切离所需要的，对整合起抑制作用。 第三十五页，共五十八页。 第三节 转座重组 一.转座重组的概念 所谓的转座重组是指DNA上的核苷酸序列从一个位置转移到另外一个位置的现象。发生转位的DNA片段被称为转座子、转座因子或移动基因等。 与前2种重组不同的是，转座子的靶点和转座子之间序列不需要同源性， 接受转座子的靶位点绝大多数是随机的。 目前已知转位因子的大小为750——40000bp。 第三十六页，共五十八页。 二、原核生物的转座因子 1、第一类转座子 即插入序列（Insertion Sequence，IS） ——是简单转座模序 只编码起始自己转座的蛋白 转座频率各异 结构特点： 两侧末端为反向重复序列（inverted repeats，IR） 第三十七页，共五十八页。 图6-15 第一类转座子的结构 第三十八页，共五十八页。 2、第二类转座子（复杂性转座子） ——带有编码转座功能酶的基因 及抗性（或其他标记）基因 复杂性转座子的结构 (transposon ，Tn) 第三十九页，共五十八页。 3、第三类转座子（复合性转座子） 由2个IS和一段带有抗性（或其他标记）基因组合而成 复合性转座子的结构 第四十页，共五十八页。 4.可转座的噬菌体 可转座的噬菌体包括Mu噬菌体和D108两种。 性质类似于温和噬菌体。（但温和噬菌体的插入位点是专一的。） 这类噬菌体插入位点几乎是随机的。（也可以插入到结构基因的内部。） 当细菌感染了这类噬菌体以后，可以引起一系列的插入突变。 特点是在插入部分的两侧有短的直接重复顺序。（一个拷贝留在原位，另外一个新合成的，拷贝插入到新的位点中去引起宿主基因组突变。） Mu不含末端反向重复顺序。 第四十一页，共五十八页。 三、真核生物的转座子 玉米地中的先知 Barbara McClintock （芭芭拉·麦克林托克） Hello, I am Barbara McClintock. Ever since gradate school I had been interested in Corn. I tried to correlate chromosome behavior with the result of breeding experiments in corn 第四十二页，共五十八页。 DNA重组 第六章 第一页，共五十八页。 DNA的重组 DNA分子内或分子间遗传信息的重新组合。重组产物为重组体DNA (recombinant DNA) 。DNA的重组广泛存在于各类生物。真核生物基因间重组多发生在减数分裂(meiosis)时同源染色体之间的交换（crossover) 。细菌及噬菌体的基因组为单倍体，来自不同亲代两组DNA之间可通过多种方式进行遗传重组。 DNA重组对生物进化起着关键的作用。生物进化是生物随时间发生变化和多样化的过程。生物进化以不断产生可遗传的变异为基础。首先有突变和重组，由此产生遗传的变异，然后才有自然选择(natural selection)，才有进化。可遗传变异的根本原因是突变。然而，突变的机率很低，而且多数突变是有害的。如果生物只有突变