干细胞分子生物学.ppt

干细胞分子生物学;干细胞;干细胞分类;;干细胞分类;胚胎发育的过程;中心的囊胚腔内一侧的细胞群，称内细胞群，这些未分化的细胞可进一步分裂、分化，发育成个体。内细胞群在形成内、中、外三个胚层时开始分化。;胚胎干细胞的来源;1998年分离得到人的胚胎干细胞 Dr. Thomson从人类胚胎的囊胚期内细胞群中直接分离 多能干细胞 (Science,1998,Vol282:1145－1147) 1998年Dr. Gearheart从终止妊娠的胎儿生殖组织中分离出多能性干细胞 (PNAS,1998,Vol95:13726－13731);胚胎干细胞的生物学特性;体外培养时，细胞排列紧密，??集落状生长。细胞克隆和周围存在明显界限，形成的克隆细胞彼此界限不清，细胞表面有折光较强的脂状小滴。细胞克隆形态多样，多数呈岛状或巢状;人的ES细胞分化潜能;胚胎干细胞的用途;胚胎干细胞应用的制约;体细胞核移植（SCNT）是得到多能性干细胞的另一种途径;体细胞核移植;体细胞去分化成为胚胎干细胞;体细胞诱导产生多能干细胞？;2006年首次提出iPS细胞的概念;iPS 细胞;iPS cells研究领域的开创者;iPS研究的源起;如何在体细胞表达候选基因;筛选诱导产生的干细胞;Fbx15 β-geo/β-geo Knock in 小鼠;同源重组构建knock out、knock in小鼠;筛选多能干细胞的诱导因子;缩小候选基因的范围;是否需要4个基因？;基因表达检测;DNA甲基化与组蛋白乙酰化对基因表达的影响;iPS细胞的形态特征;iPS细胞的增殖、基因表达、基因的甲基化模式;iPS细胞中ES细胞标志基因的表达 ;iPS细胞的表观遗传学特征 ;iPS细胞的表观遗传学特征;iPS细胞中的胚胎干表面标志物检测 ;iPS细胞的基因表达谱;裸鼠皮下注射iPS细胞诱导畸胎瘤;iPS细胞的悬浮培养和贴壁分化;;成体小鼠成纤维细胞诱导产生iPS细胞;胚胎干细胞标志基因的表达;iPS细胞核型分析;结 论;诱导体细胞多能性的候选基因; 只需要4个基因可以将体细胞去分化成为干细胞;iPS细胞是否是多能干细胞？;启示;11个月后;得到的更好的iPS细胞;Oct4-IRES-GFPneo allele;胚胎干细胞特异表达基因的表达分析;iPS细胞的基因表达模式;iPS细胞的甲基化模式;4个月后;实验方法;与人类胚胎干细胞类似的iPS细胞;与ES细胞类似的基因表达模式;胚胎干细胞标志基因的表达;DNA甲基化模式;iPS细胞分化成不同类型的细胞;裸鼠皮下注射iPS细胞诱导畸胎瘤;干细胞之争; iPS 细胞诱导效率低：不到 0.1% 安全性问题，具有致瘤性： iPS 细胞诱导过程中使用的转录因子 c-Myc 和 Klf4都是癌基因，病毒插入也可以导致肿瘤发生，而且，未分化iPS 细胞自身尚可在体内形成畸胎瘤 未来还有很多问题需要通过基础研究解决。 ;干细胞科研领域的人物介绍;;;;;;;国内从事干细胞研究的人物介绍; 高绍荣博士目前是北京生命科学研究所的高级研究员，主要研究方向为核移植和重编程。代表性的研究成果有：通过四倍体实验证实小鼠iPS细胞的发育多能性，建立疾病的iPS模型等。;袭荣文博士目前是北京生命科学研究所的研究员，主要研究方向为成体干细胞特性维持的分子调控机制，近期内代表性的研究成果有：阐明Wingless信号通路参与调控果蝇小肠干细胞的自我更新，Psc和Su(z)2通过调控Wnt信号通路抑制毛囊干细胞自我更新，TSC1/2通过抑制分化维持果蝇生殖干细胞等。 ;; 干细胞研究的前景;此课件下载可自行编辑修改，供参考！ 感谢您的支持，我们努力做得更好！