紫外可见分光光度法宣讲.pptx

紫外可见分光光度法 UV-VIS Ultraviolet-visible spectrophotometry;非光谱法 ;基于被测物质分子对光含有选择性吸收特征而建立起来分析方法,叫吸光光度法.包含： 比色法：经过比较有色溶液颜色深浅 分光光度法：依据物质对一定波长光吸收程度 ; 特点 灵敏度高： 测定下限可达10-5～10 -6mol·L-1, 10-4%～10-5% 准确度 能够满足微量组分(1%)测定要求: Er : 1%～5% －操作简便快速 应用广泛 ;12.1 概述;12.1 概述;波动性; c －真空中光速 ：~3.0 ×108m/s ?－波长：1?m=10-6m, 1nm=10-9m, 1?=10-10m ? －频率，单位：赫兹 Hz 次/秒 n －折射率，真空中为1： ? ? = c ； 波数 = 1/ ? = ? /c ; h－普朗克(Planck)常数 6.626×10-34J·s ?－频率 E－光量子含有能量 单位：J(焦耳)，eV(电子伏特) 1eV=1.602×10－19 J; 结论:一定波长光含有一定能量，波长越 长(频率越低)，光量子能量越低. ;光谱区间;单色光,复合光 ;M + 热;1.吸收光与透射光;;?/nm;300;2.吸收光谱;定性分析基础; （1）吸收光谱波长分布是由产生谱带跃迁能级间ΔΕ所决定，反应了分子内部能级分布情况--定性分析基础 （2）吸收谱带强度与该物质分子吸收光子数成正比--定量分析基础 同一个物质不一样浓度下，其吸收曲线形状相同λmax不变。在λmax处吸光度A随浓度改变幅度最大。所以测定最灵敏。此特征可作为定量分析时选择入射光波长主要依据。;1.透光率 (透射比,Transmittance );2.吸光度 (Absorbance);吸光度加合性;3. 光吸收基本定律: Lambert-Beer定律;吸光度与光程关系 A = Kbc ;吸光度与浓度关系 A = Kbc;K ? ?; 朗伯-比尔定律适用条件;溶液浓度测定; 偏离朗伯—比耳定律原因;（1）物理性原因;(2) 化学性原因;摩尔吸光系数ε讨论;4.吸光光度法灵敏度表示方法;定义：当产生吸光度为0.001时，单位截面积(1cm2)液层内所能检测出吸光物质最低含量。 用S表示，单位：?g·cm-2;A= ? bc=0.001 bc ＝0.001/ ? ;例1 邻二氮菲光度法测铁 :?(Fe)=1.0mg/L, b=2cm , A=0.38 ,计算? ，S 和; c =1.0mg/L=1.0×10-3 g /1000mL = 1.0×10-4 g/100mL; 分光光度法 ;仪器;仪器;光源：发出所需波长范围内连续光谱，有足够 光强度,稳定。 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm) 氙灯：紫外、可见光区均可用作光源;氙灯;单色器：将光源发出连续光谱分解为单色光 装置。 ;光栅：在镀铝玻璃表面刻有数量很大等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。;吸收池(比色皿)：用于盛待测及参比溶液。 可见光区：光学玻璃池（350～3200nm） 紫外区：石英池玻璃 （185～4000nm） ;吸光光度法仪器主要差异比较;二、分光光度计类型;;单波长双光束分光光度计;2;12.2 光度分析方案设计;一. 显色反应; 配位显色反应 当金属离子与有机显色剂形成配合物时，通常会发生电荷转移跃迁，产生很强紫外—可见吸收光谱。;二. 显色剂 ;CH3－C－C－CH3 HO－N N－OH ;三.显色反应选择 ;要求有色化合物与显色剂之间颜色差异应尽可能大。;Fe3+ + 磺基水杨酸 → 三磺基水杨酸铁(黄色) （组成固定） Fe3+ + SCN - → FeSCN2+、 Fe(SCN)2 + …… （组成不固定）;四. 显色条件确定;2. 显色反应酸度