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犬尿道狭窄动物模型的建立(医疗卫生论文资料)
文档信息
:
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目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:犬尿道狭窄动物模型的建立 1
1 材料与方法 2
2 结果 3
3 讨论 4
文2:犬股动脉插管动物模型的建立研究 5
1 材料与方法 5
3. 1动脉插管时的注意事项 7
3. 3插管失败后的补救措施 8
参考文摘引言: 8
原创性声明(模板) 9
文章致谢(模板) 9
正文
犬尿道狭窄动物模型的建立(医疗卫生论文资料)
文1:犬尿道狭窄动物模型的建立
尿道狭窄是泌尿外科最常见的棘手问题之一,分外伤性和炎症性两种[1]。传统治疗方法有尿道狭窄内切开、狭窄段尿道切除并吻合及尿道替代治疗等[2],但由于术后远期效果不确定及狭窄复发率高,寻找更有效的治疗手段十分必要。利用动物模型进行尿道狭窄的基础性研究已有成功经验,但多采用兔或鼠等构建模型。雄犬个体较大,其尿道有尿道海绵体支撑,组织形态学更接近人类尿道生理情况。本实验利用内窥镜下电切伤手段,建立犬前尿道狭窄动物模型,为探讨瘢痕性尿道狭窄的分子生物学防治提供理想的研究对象。
1 材料与方法
实验动物 雄性成年犬15只(由西安交通大学医学院实验动物中心提供),标准饲料,自由饮水,饲养观察1周。
主要仪器设备 好克N4210(0°、F10)小儿电切镜(西安三杰电子科技有限公司提供)、Olympus OTVS6内窥镜图像系统、Olympus CLE4E冷光源、SONY Trinitron显示器、高频发生器(西安交通大学医学院第二附属医院泌尿外科提供)、F10导尿管、眼科手术器械(西安交通大学医学院第二附属医院外科动物实验中心提供)、SHIMADZU(岛津)胃肠拍片机(放射影像中心提供)
主要药品试剂 10g/L戊巴比妥钠,青霉素钠80万/支,760g/L泛影葡胺,10%(体积分数)甲醛固定液,液氮固定液。
模型制作 按参考文献[34]作相应改动,制作犬尿道狭窄模型。15只雄犬分批用10g/L戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉注射麻醉,仰卧位固定,做阴茎包皮腹侧切开,充分暴露尿道外口。经尿道外口插入F6导管,置管深度1cm,用760g/L泛影葡胺加入生理盐水,稀释至150g/L浓度做逆行尿道造影。随机抽取3只犬设为对照组,同步观察。余12只雄犬用好克F10小儿电切镜,置镜深度5-6cm,电切功率30W,5%葡萄糖作冲洗液,在尿道镜视野内5-7点位置,直视下用直径2mm环状电极行犬前尿道电切术,造成面积约2mm×3mm穿透尿道全层的手术创面。术前1d、术后3-5d用青霉素80万u溶于100mL生理盐水静滴,2次/d。观察每日犬排尿状况,继续饲养1月。术后第15天和30天时分别麻醉动物,做尿道镜及尿道造影检查。术后第31天,所有实验犬被麻醉后,活体采集尿道标本。切取狭窄段尿道组织,标本用10%(体积分数)甲醛溶液固定、石蜡包埋后5μm厚连续切片,分别做HE(苏木素伊红染色液)和VG染色(Van Gieson,胶原纤维染色)。光镜下观察标本的组织形态学改变,进一步证实尿道瘢痕组织的形成。
2 结果
电切术后排尿状况 所有实验组犬在尿道电切割损伤后均未做膀胱造瘘,观察犬自主排尿状况。在术后3d内,1只犬死于术后尿道感染,3只犬术后当天发生尿潴留,予耻骨上膀胱穿刺排尿一次。全部实验犬均表现出阴茎红肿,有不同程度的排尿困难,以尿流滴沥为主。术后1周,存活实验犬排尿困难症状逐渐缓解,但仍有尿流间断表现。术后2周时各实验犬排尿基本恢复正常。
电切术后尿道造影情况 对照组犬尿道造影黏膜光滑(图1)。电切术后第15天,4只(%)实验组犬在尿道损伤部位形成瘢痕性狭窄;术后第30天,存活的11只(%)犬在尿道损伤部位均有瘢痕组织形成,导致该段尿道不同程度的狭窄,尿道造影片上有典型切迹表现。
电切术后第30天尿道镜检 F10电切镜下均能清晰观察到实验犬尿道损伤部位的典型环状瘢痕,尿道镜不能自由通过,狭窄环黏膜苍白、结构僵硬、弹性丧失。
电切术后第31天尿道组织形态学观察 和正常犬尿道光镜下的组织形态结构(图4)相比,实验犬尿道电切损伤部位管腔上皮变薄易脱落,固有层不连续,大量结缔组织填充且其内可见较多细胞成分,同时可见较多炎性细胞浸润(图5)。VG染色切片光镜下观察,胶原纤维呈红色,于细胞间散在分布。尿道瘢痕组织中胶原纤维粗大,密集成束或成行状排列。
3 讨论
尿道狭窄的形成与皮肤瘢痕形成有相似之处,其病理学改变是在黏膜和肌
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