第六章真核生物基因表达调控演示教学.pptVIP

2、锌指（zinc finger） Zn2+与4个Cys 、或2个Cys和2个His相结合。 整个蛋白质分子有2-9个锌指重复单位。 每一个单位的指部伸入DNA双螺旋的深沟，接触5个核苷酸。 （教材P.301-303） （1）I型锌指：2Cys / 2His ~23aa Cys- X2-4- Cys-X3-Phe- X5 -Leu- X2 -His- X3 -His Cys，His与Zn2+结合形成4面体结构，使中部的氨基酸回折成环，凸出如手指 中部芳香族氨基酸保守，疏水 串联重复排列，两指间7-8aa 锌指数目多少不等 与GC盒结合的转录因子SP1中有连续的3个锌指重复结构。 SP1 TF III A 344aa，N端与DNA结合 9个锌指，每个～30aa 与5s rRNA基因内启动子 （50bp)结合 （2）Ⅱ型锌指：4Cys 保守序列为： Cys- X2- Cys-X13-Cys- X2- Cys Zn2+与4个Cys结合 DNA结合序列较短，对称 无大量重复性锌指 Cys2/Cys2与 Cys2/His2不同 例如GAL4，酵母的转录因子，哺乳类的固醇类激素受体 糖皮质激素特异性 雌激素特异性 类固醇激素受体是以二聚体形式发挥其促进转录作用的。它们的两个锌指的功能不同。 第1个锌指的右侧是控制与DNA结合的，第2个锌指的左侧则是控制形成二聚体的能力的。 3、同源域（Homeodomain） 最早在果蝇的homeotic loci（决定身体结构）中发现同形异位现象(homeosis): 果蝇头部长触角部位长出脚来。 同形异位盒基因(homeobox) : 高度保守的一段核苷酸序列（180bp）, 控制胚胎发育的基因。 从酵母到人类都存在； homeobox, DNA序列高度保守。 （教材P.304-305） Homeodomain 有3个?—helix, H1与H2平行 H2与H3形成HTH motif H3位于大沟中，与DNA特异结合 N末端位于小沟中，与DNA接触 HD与HTH的不同： （1）HD的C端由3个α-螺旋构成，螺旋3结合于大沟；而HTH至少2个α-螺旋构成； （2）HTH以二聚体形式与DNA结合，而HD是以单体形式与DNA结合。 -COOH，每隔6个氨基酸出现一个Leu，所有Leu出现在同一侧面，成直线排列，形成疏水面 依靠Leu的疏水作用，2个helix 相互缠绕，形成拉链结构 -NH2,富含碱性氨基酸，螺旋状，＋，碱性DNA结合域， 与DNA双螺旋链上带负电荷的磷酸基团结合 4、碱性－亮氨酸拉链（basic leucine zipper, bZIP） （教材P.303-304） 5、碱性螺旋--环--螺旋（basic helix-loop-helix） 40～50aa 含2个?-helix（15~16aa）, 由连接区（12~28aa）连接；两亲性, amphipathic；通过疏水面作用形成二聚体； －NH2端为碱性结合区，16aa，其中6aa为保守序列。 （教材P.304） 缺乏碱性区的蛋白质，即使形成（同、异）二聚体，也无法同DNA结合 （四）蛋白质和配体的结合 甾类受体蛋白有3个不同的功能区： （1）N-端区是激活转录所需的区域，不同受体之间此区的同一性仅小于15%； （2）DNA结合及转录活化区，同一性较高为94-42%； （3）C-端的激素结合和二聚体形成区，同一性为57-15%。? 糖皮质激素对转录的调控 激素-受体复合物进入细胞核，与增强子结合从而激活启动子，开始转录。 糖皮质激素进入细胞，与受体结合； （五）DNA结合蛋白主要转录激活结构域 转录激活结构域（transcription activation domains）一般由20-100个氨基酸残基组成。如GAL4分子中有2个这种结构域，分别位于多肽链的第147-196位和第768-881位；GCN4的转录激活结构域位于多肽链的第106-125位。 （教材P.305-306） 1、酸性α-螺旋（acidic α-helix）（A区） 该结构域含有由酸性氨基酸残基组成的保守序列，多呈带负电荷的亲脂性α-螺旋，包含这种结构域的转录因子有GAL4、GCN4、糖皮质激素受体和AP-1/Jun等。增加激活区的负电荷数能提高激活转录的水平。可能是通过非特异性的相互作用与转录起始复合物上的TFIID等因子结合生成稳定的转录复合物而促进转录。 2、谷氨酰胺丰富区(glutamine-rich domain)（P区） SP1的N末端含有2个主要的转录激活区，氨基酸组成中有25%的谷氨酰胺，很少有带电荷的氨基酸残基。酵母的HAP1、HAP2和GAL2及哺乳动