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生物大分子血红蛋白印迹聚合物膜的制备(行业资料)
文档信息
:
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目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:生物大分子血红蛋白印迹聚合物膜的制备 1
文2:工程教育认证下聚合物制备工程教学 7
1准确定位培养目标,合理制定课程教学目标和教学内容 7
2构建学生中心的教学体系,积极改进教学方法和手段 9
3质量持续改进 10
4结语 11
参考文摘引言: 11
原创性声明(模板) 12
文章致谢(模板) 12
正文
生物大分子血红蛋白印迹聚合物膜的制备(行业资料)
文1:生物大分子血红蛋白印迹聚合物膜的制备
DOI:/-.048
收稿日期:2014-12-16
作者简介:薛春霞(1981-),女,河南焦作人,讲师,硕士,主要从事电分析研究,(电话)(电子信箱)xuecx163@163.com。
分子印迹聚合物对模板分子的立体结构具有“记忆”功能,从而对模板表现出高度选择性识别能力。依据功能单体和模板分子的作用机理不同,分子印迹可分为共价印迹和非共价印迹两大类。前者是模板分子与功能单体先通过共价键结合继而进一步聚合进行印迹的方法;而后一种方法是基于模板分子与功能单体之间通过氢键、离子键、π堆积、范德华力等形成预组织化合物,在此基础上进一步聚合得到印迹聚合物。鉴于分子印迹聚合物对模板的选择性识别能力,其作为分离富集材料和传感器的敏感元件以及催化剂等在诸多分析领域的应用前景一直备受关注[1]。然而迄今为止,有关分子印迹技术的研究大多停留在小分子的印迹上,人们在氨基酸[2,3]、金属离子[4]、小分子药物[5]等为模板的分子印迹研究中已经取得长足进步。而对于生物大分子,如蛋白质的分子印迹研究还鲜有成功的范例[6-8]。应用到电极表面的生物大分子印迹聚合物的研究也极少报道。电化学分析方法具有很高的灵敏度,简单方便,在传感器研究中被广泛应用为换能器。将具有特异选择性的分子印迹聚合物与电化学分析技术相结合,可以制备出具有高选择性和灵敏度的分子印迹电化学传感器。本试验将尝试在电极表面使用电化学方法引发丙烯酰胺制备血红蛋白分子印迹聚合物,并对印迹膜的性质、选择性及检测能力进行研究。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
电化学工作站CHI660B(上海辰华仪器公司);扫描电子显微镜Quanta600FEG(宁波新芝生物科技股份有限公司);超声波清洗机SB4200DTD(宁波新芝生物科技股份有限公司);红外干燥箱CJ-1(上虞市道墟星峰仪器厂);电子天平ESJ60-4(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司)
牛血红蛋白(BHb)(Sigama化学试剂公司):溶液用磷酸盐缓冲溶液配制(0.01 mol/L,pH 7.0);丙烯酰胺(AM)[梯希爱(上海)化成工业发展有限公司];N,N’-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)(阿拉丁工业有限公司);pH 7.0的KH2PO4-K2HPO4缓冲溶液;所用其他试剂均为分析纯。
1.2 试验方法
试验采用循环伏安法、差分脉冲伏安法等电化学方法在CHI660B电化学工作站(上海辰华仪器公司)上和三电极单室电解池中进行。
碳糊电极(CPE)的制备:称取3.4 g光谱纯石墨粉和0.6 g液体石蜡置于小烧杯中,搅拌30 min,使其混合均匀呈糊状,取适量碳糊填入经乙醚和丙酮处理干净的PVC塑料管中,将铜丝固定到碳糊中,再将电极表面打磨光滑。完成后将电极在PBS缓冲溶液(0.10 mol/L pH 7.0)活化扫描。
2 结果与分析
2.1 BHb分子印迹聚合物膜修饰电极的初步制备
试验以碳糊电极为工作电极,铂电极为对电极,饱和甘汞电极为参比电极。电聚合底液是10 mL KH2PO4-K2HPO4的缓冲溶液,在底液中依次加入50 mg BHb(模板分子),0.75 g AM(功能单体),0.1 g MBA(交联剂),0.25 g NaNO3和0.13 g K2S2O8(引发剂),超声波混合、溶解均匀。试验前,上述溶液通氮气除氧10 min,然后放入经过预处理的碳糊电极,在(-0.2)~(-1.4)V(vs.SCE)用循环伏安法循环扫描5圈,扫描速度为0.02 V/s。电聚合完成后在KH2PO4-K2HPO4的缓冲溶液中用循环伏安法检测BHb的氧化还原峰(图1)[9]。在(-0.2)~(-0.4)V出现BHb的还原峰,初步说明BHb已固定在电极表面上。为了进一步说明出现的峰是BHb的还原峰,特做了对比试验。将5 mg/mL BHb溶液用微量进样器滴涂到裸电极表面。等电极
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