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维生素E对毒死蜱胁迫下斑马鱼血清CAT和SOD的保护作用(行业资料)
文档信息
:
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目录
TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1
正文 1
文1:维生素E对毒死蜱胁迫下斑马鱼血清CAT和SOD的保护作用 1
文2:麝香保心丸促进斑马鱼血管生成作用 7
1 材料与方法 8
2 结果 9
3 讨论 10
参考文摘引言: 13
原创性声明(模板) 14
文章致谢(模板) 14
正文
维生素E对毒死蜱胁迫下斑马鱼血清CAT和SOD的保护作用(行业资料)
文1:维生素E对毒死蜱胁迫下斑马鱼血清CAT和SOD的保护作用
DOI:/-.014
毒死蜱(Chlorpyrifos)商品名为乐斯本,具有触杀、胃毒和熏蒸作用,凭借其高效、低毒、广谱的特性成为全球应用最为广泛的农药之一[1]。毒死蜱主要通过干扰胆碱酯酶的活性,从而影响人类和昆虫的中枢神经系统[2]。毒死蜱类有机磷农药对哺乳动物的毒性较低,但对水生鱼类的毒性却比较高,若使用不当进入水环境,将对水生生态和水产养殖带来比较大的危害[3]。由于毒死蜱的大量使用,在较多地区的土壤、大气、雨水和地下水等均能检测到毒死蜱残留,水体也由于毒死蜱污染累积导致鱼类死亡。农药对环境产生的危害最终会通过富集浓缩和食物链传递给人类[4]。因此,研究毒死蜱的毒理作用将可为农药安全使用,水产资源和生态环境保护提供理论依据。
外源毒物通过各种途径进入生物机体后,感染机体会出现各种生物标记物的改变,这种生物标记物常用来评估受试化学品对生物的生态毒理效应[5],过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)是生物标记物中最典型的两种酶。CAT和SOD是体内清除自由基的抗氧化酶,它们之间通过协同作用能够防止自由基对细胞结构的损伤[6]。环境污染物质对水生生物会造成过氧化胁迫,使生物体内产生大量自由基[7],SOD能催化歧化体内超氧阴离子自由基为过氧化氢(H2O2),CAT催化H2O2分解为H2O和O2。通过CAT和SOD调节体内的氧自由基处于平衡的状态,一旦机体受到毒理损伤,这种平衡就会被打破,因而CAT和SOD作为抗氧化防御系统的改变就能反映环境对机体的毒害作用。本试验研究了毒死蜱对斑马鱼血清中CAT和SOD的影响,以衡量农药对水产环境及水生生物的生态毒理指标。
维生素E有许多生理功能,其中最重要的功能就是抗氧化。维生素E能有效防止机体脂质过氧化及由于外因所致的氧化,保护细胞骨架、蛋白质巯基,维持细胞膜的正常功能,尤其是保护亚细胞膜的完整性,避免受到过氧化物损害[8]。另外维生素E还能防治由氧化应激导致的心血管疾病、动脉粥样硬化和癌症等[9]。本研究表明维生素E能够有效保护CAT和SOD在斑马鱼血清中的活性,减轻毒死蜱对机体造成的过氧化胁迫。
1 材料与方法
1.1 材料
斑马鱼由中国科学院水生生物研究所提供,平均体长2~3 cm。试验前在室内驯养7 d以上,自然死亡率小于2%,试验前1天停止喂食,试验期间每48 h定量喂食1次。
1.2 试剂与仪器
毒死蜱原药(98%,安徽华星化工股份有限公司),用无菌生理盐水配成不同浓度溶液待用。其他试剂均为国产分析纯。仪器为UV-2550型紫外-可见分光光度计(岛津制作所)
1.3 方法
1.3.1 试验设计和染毒 试验共分5组,分别为阴性对照组、低中高3个浓度梯度试验组和1个高浓度联合维生素E组。根据急性毒性试验结果,以0.002、0.02、0.2 mg/kg剂量对斑马鱼进行肌肉注射,每组25尾鱼,每尾注射1 mL毒死蜱溶液,分别于容积10 L塑料箱中装水饲养。维生素E剂量为100 mg/kg,稀释液现配现用,使用时在旋涡混悬仪上充分混匀。试验用水为曝气去氯处理24 h后的自来水,水温17~20 ℃,pH为6.8~7.5,水中溶氧量保证5 mg/L以上。按预定时间段0、24、48、96、168 h时分别取鱼采样进行分析,每组浓度每次取样5尾。
1.3.2 取血采样 采样之前,先用1%肝素钠处理注射器,于鱼尾采血,直接放入干净试管中以制备血清,对血清CAT和SOD活性进行测定。
1.3.3 酶活力测定方法 CAT活性测定采用Góth[10]的方法,以H2O2为底物,经CAT在37 ℃催化反应1 min后,用钼酸铵终止反应,在25 ℃放置5 min,由于反应后剩余的过氧化氢能与钼酸铵形成稳定的黄色复合物,其颜色的深浅与酶活力成反比,因此在405 nm处测量该黄色复合物的生成量,即可计算出CAT的活力。
SOD活性测定采用经典的邻苯三酚
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