新教材高中生物选择性必修3精品课件：第3章 实验突破二　DNA片段的扩增及电泳鉴定(人教版).pptxVIP

实验突破二　DNA片段的扩增及电 　　　　　　泳鉴定;一、实验原理;(3)迁移速率：在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的　　、DNA分子的　　和　　有关。 (4)检测：凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300 nm的　　灯下被检测出来。;二、方法步骤;6.将扩增得到的PCR产物与　　　　　　　(内含指示剂)混合，再用___ 　　　　将混合液缓慢注入凝胶的加样孔内。 7.接通电源，根据电泳槽阳极至阴极之间的距离来设定电压，一般为 　　　　　。待指示剂前沿迁移接近　　　　时，停止电泳。 8.电泳结束后，取出凝胶置于紫外灯下观察和照相。;三、操作提示;四、关键点拨;例1　下列关于电泳的说法，错误的是 A.电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程 B.带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动 C.DNA在琼脂糖凝胶中的迁移速率与凝胶的浓度有关 D.用琼脂糖凝胶电泳，DNA的电泳迁移速率完全取决于分子的大小;例2　用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时，得到以下电泳图谱，其中1号为DNA标准样液(Marker)，10号为蒸馏水，PCR时加入的模板DNA如图所示。据此作出的分析，不合理的是;解析　PCR过程中，可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段，4～9号是转基因植株，理论上应包含目的基因，结合2号野生型和10号蒸馏水组的结果，推测包含目的基因的片段大小应为250～500 bp，A正确； 3号PCR结果包含250～500 bp片段，应包含目的基因，B错误； 9号PCR结果不包含250～500 bp片段，所以不是所需转基因植株，C正确； 10号放入蒸馏水，可排除反应体系等对结果的干扰，D正确。;1.下列关于PCR操作过程的叙述，错误的是 A.PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前 　必须进行高压灭菌处理 B.PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，在－20 ℃储存 C.将PCR所用缓冲液和酶从冰箱拿出，需放在高温环境中迅速融化 D.在向微量离心管中添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上 　的枪头都必须更换;1.下列关于PCR操作过程的叙述，错误的是 A.PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前 　必须进行高压灭菌处理 B.PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份，在－20 ℃储存 C.将PCR所用缓冲液和酶从冰箱拿出，需放在高温环境中迅速融化 D.在向微量离心管中添加反应组分时，每吸取一种试剂后，移液器上 　的枪头都必须更换;2.下列关于DNA片段的扩增及电泳鉴定实验的叙述，错误的是 A.PCR过程需要TaqDNA聚合酶 B.PCR过程通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合 C.PCR扩增区域由两种引物来决定 D.电泳时，DNA的迁移速率与凝胶的浓度有关，与DNA分子的大小无关;解析　PCR反应需要高温使DNA变性解旋，所以复制过程中要用耐高温的DNA聚合酶，A正确； PCR过程中DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从引物的3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物，由于DNA的两条模板链反向平行，所以复制时需要两种引物，且PCR扩增区域由这两种引物来决定，C正确； 电泳时，DNA的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关，D错误。;3.(2021·北京海淀区模拟)在基因工程操作中，科研人员利用识别两种不同序列的限制酶(R1和R2)处理基因表达载体，进行琼脂糖凝胶电泳检测，结果如图所示。以下相关叙述错误的是;解析　当仅用一种限制酶切割载体时，仅产生一种长度约为800 bp的DNA片段，因此该载体最有可能为环状DNA分子，A正确； 两种限制酶同时切割时则产生两种长度的DNA片段，所以两种限制酶在载体上各有一个酶切位点，B正确；;4.下列关于DNA片段的扩增及电泳鉴定步骤的说法，错误的是 A.PCR过程中，需要加入两种引物 B.所有组分加入微量离心管后，需要放入离心机离心约10 s C.将电泳缓冲液加入电泳槽中，电泳缓冲液没过凝胶1 mm为宜 D.电泳出现位置不等的几条条带，说明鉴定的PCR产物比较纯净;4.下列关于DNA片段的扩增及电泳鉴定步骤的说法，错误的是 A.PCR过程中，需要加入两种引物 B.所有组分加入微量离心管后，需要放入离心机离心约10 s C.将电泳缓冲液加入电泳槽中，电泳缓冲液没过凝胶1 mm为宜 D.电泳出现位置不等的几条条带，说明鉴定的PCR产物比较纯净;5.用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，两种引物及其与模板链的结合位置如图所示。经4轮循环后产物中有五种不同的DNA分子，下列叙述错误的是;A.第一轮复制得到2个DNA分子，即①②各一个 B.第二轮复制得到4个DNA分子，即①②③④各一个 C.第三轮复制得到8个DNA分子，其中有2个是