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- 2022-08-29 发布于四川
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第一次加氯化钠后,必须充分晃动烧杯,使二者混合均匀,加速染色质中DNA与蛋白质分离,使DNA充分游离并溶解在氯化钠溶液中。第二次加氯化钠溶液也是为了DNA的再溶解,这时溶液中的蛋白质含量已很少。第三次加氯化钠溶液还是为溶解DNA。 课题 DNA的粗提取与鉴定 染色体成分 蛋白质 RNA(少量) DNA 提取DNA的基本思路: 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 * DNA的粗提取与鉴定 1.原理、方法和目的 基本原理 方法 目的 DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低 溶于NaCl溶液中并稀释 ①NaCl溶液为2 mol/L时,DNA溶解,而部分蛋白质发生盐析生成沉淀,通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质 ②当NaCl溶液稀释至0.14 mol/L时,DNA析出,过滤可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白质和其他杂质 DNA不被蛋白酶所水解 加入嫩肉粉 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,水解蛋白质(酶的专一性) DNA不溶于酒精溶液 加入冷却酒精(95%) DNA析出,除去溶于酒精的蛋白质 DNA可被二苯胺染成蓝色 加入二苯胺,并沸水浴 鉴定DNA 高温 DNA耐高温 DNA和蛋白质对高温耐受性不同:蛋白质、DNA热
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