DB34∕T 4207-2022 鸡排泄物中氧氟沙星的含量检测 高效液相色谱-荧光检测法.docxVIP

ICS 67.120.20 CCS X 18 34 安 徽 省 地 方 标 准 DB34/T 4207—2022 鸡排泄物中氧氟沙星的含量检测高效液 相色谱-荧光检测法 Determination of ofloxacin in excrements of chicken—High performance liquid chromatography-fluorescence detection method 2022-06-29发布 2022-07-29实施 安徽省市场监督管理局 发布 DB34/T 4207—2022 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由安徽省兽药饲料监察所提出。 本文件由安徽省农业农村厅归口。 本文件起草单位：安徽中青检验检测有限公司、安徽省兽药饲料监察所、安徽天祥检验检测有限公 司、望江县农产品质量安全中心、安徽省农业科学院畜牧兽医研究所、安徽农业大学、阜阳市农业综合 行政执法监督支队、泗县草沟镇畜牧兽医水产站、定远县康源农牧科技股份有限公司、合肥市动物疫病 预防控制中心。 本文件主要起草人：许世富、潘孝成、谢军池、王媛媛、韩素珍、凃健、许晓靖、祁钊、吴昊、刘 发全、马腾飞、郝金华、陈守美、谢俊东、宋亚伟。 I DB34/T 4207—2022 鸡排泄物中氧氟沙星的含量检测 高效液相色谱-荧光检测法 1 2 范围 本文件规定了鸡排泄物中氧氟沙星含量的高效液相色谱-荧光检测方法。 本文件适用于鸡排泄物中氧氟沙星含量的测定。 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法 3 4 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 原理 试样中的氧氟沙星用乙酸甲醇溶液超声提取，经离心、过滤、浓缩后，高效液相色谱分离，用荧光 检测器测定，外标法定量。 5 试剂和材料 除特殊说明外，本方法所用试剂均为分析纯，水为符合 GB/T 6682规定的一级水。 试剂 5.1.1 5.1.2 5.1.3 5.1.4 5.1.5 5.1.6 乙腈：色谱纯。 甲醇。 乙酸。 盐酸。 磷酸：85％。 三乙胺。 溶液配制 5.2.1 0.1 mol/L盐酸溶液：取盐酸 9 mL，加水稀释到 1000 mL，混匀。 5.2.2 20％乙酸甲醇溶液：取乙酸 200 mL，加入甲醇溶液至 1000 mL，混匀。 5.2.3 0.02 mol/L磷酸溶液：称取 85％的磷酸 2.31 g，加水溶解并定容至 1000 mL，混匀。 5.2.4 三乙胺磷酸溶液：取 0.02 mol/L磷酸溶液 1000 mL，加入 1.4 mL三乙胺，混匀。 1 DB34/T 4207—2022 5.2.5 流动相：分别取乙腈和三乙胺磷酸溶液（5.3.4）按体积比 10：90混匀。 标准品及标准溶液配制 5.3.1 5.3.2 标准品：氧氟沙星标准品（CAS号：82419-36-1），纯度≥ 98.0％。 标准储备液（0.5 mg/mL）：取氧氟沙星标准品 10 mg，精密称定，用 1 mL的 0.1 mol/L盐 酸溶解后，加水稀释并定容至 20 mL容量瓶，配制成浓度为 0.5 mg/mL的标准储备液，于 4℃避光保 存，有效期 3个月。 5.3.3 标准工作液（10 μg/mL）：准确量取上述标准储备液（0.5 mg/mL） 1 mL，加水稀释并定容至 50 mL容量瓶，配制成浓度为 10 μg/mL的标准工作液，于 4℃避光保存，有效期 1个月。 6 仪器和设备 高效液相色谱仪：配荧光检测器。 分析天平：感量 0.1 g、0.1 mg、0.01 mg。 高速冷冻离心机：≥ 16000 r/min。 超声波仪。 氮吹仪。 涡旋混合仪。 无机滤膜：0.45μm。 7 试样的制备与保存 试样的制备 取适量新鲜或解冻的空白或供试鸡排泄物，混匀，如下： ——取混匀后的供试样品，作为试样； ——取混匀后的空白样品，作为空白试样； ——取混匀后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试样作为空白试样。 试样的保存 -18℃以下保存，3个月内进行分析测试。 8 测定步骤 提取 称取 5 g（精确至 0.1 g）鸡排泄物样品，加入 20％乙酸甲醇溶液（5.3.2） 10 mL，以 2500 r/min涡旋混匀 30 s，超声溶解 15 min，以 5000 r/