蛋白质的生物合成 (7).pptVIP

15.2 蛋白质的合成过程 蛋白质生物合成可分为五个阶段 氨基酸的活化与转运 多肽链合成的起始 肽链的延长 肽链的终止和释放 蛋白质合成后的加工修饰 第30页，共76页，2022年，5月20日，4点47分，星期六 氨基酸在掺入肽链前必须活化，在胞液中进行。 氨基酸的活化是指各种参加蛋白质合成的AA与携带它的相应的tRNA结合成氨酰- tRNA的过程。 活化反应在氨酰-tRNA 合成酶的催化下进行。 1.氨基酸的活化与转运 第31页，共76页，2022年，5月20日，4点47分，星期六 氨基酸活化的总反应式： 氨酰-tRNA 合成酶 氨基酸+ATP+tRNA +H2O 氨酰-tRNA+AMP+PPi 第32页，共76页，2022年，5月20日，4点47分，星期六 活化过程 -1：AA-AMP-E复合物的形成 E-CR1-C-O ~P-O- CH2 = O OH - O 腺嘌呤 OH OH O NH2 高能酸苷键 AA+ATP+E AA-AMP-E +PPi Mg 2+ Mn 2+ 第33页，共76页，2022年，5月20日，4点47分，星期六 活化过程-2 P P P C C A O C-C-R O H NH3 + OH 2?-OH连接AA，影响下一步肽键形成 AA-AMP-E+ tRNA 氨酰-tRNA +AMP+E 第34页，共76页，2022年，5月20日，4点47分，星期六 氨基酰tRNA合成酶的活性是专一性的，酶同时对氨基酸和tRNA高度特异地识别。 氨基酰tRNA合成酶还有校正活性。 （editing activity） 注意： 氨基酸，氨基酰tRNA合成酶，tRNA及mRNA上的密码子是一对一的关系，从而保证了遗传信息从mRNA准确地传递到蛋白质上。 第35页，共76页，2022年，5月20日，4点47分，星期六 氨酰- tRNA合成酶可分为两类： Ⅰ类酶 先将氨酰基转移到 tRNA 3’ 端A的 2’-OH 然后通过转酯反应转移到 3’-OH上。 Ⅱ类酶 直接将氨酰基转移至 3’-OH 上。 注意： 第36页，共76页，2022年，5月20日，4点47分，星期六 氨基酰-tRNA的表示法： 氨基酸名称 - 运载特异的氨基酸 具体作用 i 起始 e 延长 1，2－同意义tRNA ,用下标区分。 举例： tRNA 丙氨酰tRNA：ala-tRNAala 精氨酰tRNA：arg-tRNAarg 甲硫氨酰tRNA： met-tRNAmet 起始密码子AUG编码的met由tRNAimet （真核）或tRNAfmet（原核）转运。 tRNAimet 和 tRNAfmet称为起始者 （initiator）tRNA。 tRNAemet 第37页，共76页，2022年，5月20日，4点47分，星期六 2.肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex) 第38页，共76页，2022年，5月20日，4点47分，星期六 1） 30S小亚基首先与翻译起始因子IF-1结合，再在SD序列的帮助下与mRNA模板结合,形成30S. mRNA. IF-3. IF-1复合体。 2）由30S 小亚基、起始因子IF –1和IF-3及模板mRNA所组成的复合物立即与GTP-IF-2及fMet-tRNAfMet相结合,形成30S.起始复合体 3）70S起动复合体的形成： IF3从30S起动复合体上脱落，50S大亚基与复合体结合，GTP被水解，IF1和IF2从复合物上脱落。 此时，tRNAfmet的反密码UAC与mRNA上的起动密码AUG互补结合，tRNAfmet结合在核蛋白的给位（P位）,形成70S起始复合体。 步骤 第39页，共76页，2022年，5月20日，4点47分，星期六 原核细胞中参与蛋白质合成的起始因子(IF)及其作用 注意的问题-Ⅰ IF 不同 形式 MW GTP结合 能力 生物学活性 IF-1 9500 - 无特异功能，但具有加强 IF2和IF3的活性作用。 IF-2 IF-2a IF-2b 117000 85000 + 生成IF-2.GTP.fMet-tRNAfmet与前起始复合物结合形成30S三元复合物 IF-3 IF-3a IF-3β 20668 19997 - 1. 使得30S与mRNA结合，形成前起始复合物 。 2.解离活性，使70S核糖体颗粒解离为30S和50S亚基。 第40页，共76页，