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在多肽链上每增加一个氨基酸都需要经过进位,转肽和移位三个步骤。 1. 进位 为密码子所特定的氨基酸tRNA结合到核蛋白体的A位,称为进位。氨基酰tRNA在进位前需要有三种延长因子的作用,即,热不稳定的EF(Unstable temperature,EF)EF-Tu,热稳定的EF(stable temperature EF,EF-Ts)以及依赖GTP的转位因子。EF-Tu首先与GTP结合,然后再与氨酰tRNA结合成三元复合物,这样的三元复合物才能进入A位。此时GTP水解成GDP,EF-Tu和GDP与结合在A位上的氨基酰tRNA分离。 第31页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 第32页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 2. 转肽--肽键的形成(peptide bond formation) 在70S起始复合物形成过程中,核糖核蛋白体的P位上已结合了起始型甲酰蛋氨酸tRNA,当进位后,P位和A位上各结合了一个氨基酰tRNA,两个氨基酸之间在核糖体转肽酶作用下,P位上的氨基酸提供α-COOH基,与A位上的氨基酸的α-NH2形成肽键,从而使P位上的氨基酸连接到A位氨基酸的氨基上,这就是转肽。转肽后,在A位上形成了一个二肽酰tRNA。 第33页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 第34页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 3. 移位(Translocation) 转肽作用发生后,氨基酸都位于A位,P位上无负荷氨基酸的tRNA就此脱落,核蛋白体沿着mRNA向3端方向移动一组密码子,使得原来结合二肽酰tRNA的A位转变成了P位,而A位空出,可以接受下一个新的氨基酰tRNA进入,移位过程需要EF-G,GTP和Mg2+的参加。 第35页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 关于蛋白质的生物合成 (9) 第1页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 蛋白质的生物合成-翻译(translation): 是指在核糖体上,以mRNA为模板,根据每3个相邻核苷酸决定一种氨基酸的三联体密码规则,由tRNA运送活化的氨基酸,GTP提供所需能量,合成出具有特定氨基酸顺序的蛋白质肽链的过程。 第2页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 遗传信息的传递与表达 第3页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 翻译(蛋白质的生物合成): 以氨基酸为原料 以mRNA为模板 以tRNA为运载工具 以核糖体为合成场所 起始、延长、终止各阶段蛋白因子参与 合成后加工成为有活性蛋白质 第4页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 一、遗传密码 蛋白质是由20种氨基酸组成的,DNA是由A,T,C和G四种脱氧核糖核苷酸构成的,但是脱氧核糖核苷酸残基顺序决定了氨基酸的顺序! 第5页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 (一)三联体密码的确立 3个相连的核苷酸代表1个氨基酸,即每3个相连的核苷酸组成1个密码子,称为三联体密码。 组成蛋白质的氨基酸有20种,核酸中只有4种核苷酸: 41=4 <20 42=16<20 43=64>20 第6页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 三个不同的实验证明了遗传密码是由mRNA上3个连续的核苷酸残基构成的,称为三联体密码子(triplet codons),下图给出了三个证明遗传密码是三联体密码的著名实验的示意图。 第7页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 第8页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 (二)遗传密码子的破译 利用以下三方面的研究工作进行密码子的破译工作: 1、人工合成多种寡核苷酸作为mRNA模板; 2、建立无细胞翻译系统; 3、核糖体结合技术; 应用上述方法,花了5年时间,Nirenberg等于1966年完成了20种氨基酸的全部密码的破译,并编制出了遗传密码字典。 第9页,共49页,2022年,5月20日,4点47分,星期六 1966年,全部遗传密码都被破译。左表给出了大肠杆菌中用于蛋白质合成的遗传密码,这些遗传密码
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