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PEG模拟干旱胁迫对水稻抗氧化酶基因表达的影响
摘要:【目的】干旱是影响水稻生产的重要环境因素之一,在干旱条件下水稻植株体内会发生一系列的抗逆反应,其中参与防御反应的关键酶基因表达会发生明显的变化。因此,本研究拟分析干旱胁迫处理后抗氧化酶类基因的表达变化,为进一步研究水稻抗旱机制提供理论参考。【方法】采用质量体积比为0(ck)、18%、20%、22%、24%、26%的聚乙二醇(peg6000)对三叶一心期的籼稻航2号植株进行干旱胁迫处理,筛选适合处理籼稻航2号的peg6000质量体积比;进一步采用peg6000对航2号植株进行干旱胁迫处理,分别于处理0、2、4、8、12、24、48、72h取样;并用sybrgreeni荧光定量pcr(qrt-pcr)分析peg6000处理不同时间段后植株中抗氧化酶类基因表达,包括过氧化氢酶(cata、catb、catc)、过氧化物酶(pox5.1、pox1)、超氧化物歧化酶(plastidiccu/zn-sod,cytosoliccu/zn-sod)、抗坏血酸过氧化物酶(apx)、谷胱甘肽还原酶(gr)基因的表达变化。【结果】根据表型观察和植株存活率,筛选出籼稻航2号对peg6000的耐受临界质量体积比为22%;qrt-pcr结果表明peg6000胁迫处理后9个基因的表达均出现上调,大部分基因表达都呈先上调后下调的趋势,且一般peg处理4h之后基因表达出现较明显上调,说明这些基因均不同程度地参与了peg胁迫反应;其中,过氧化氢酶a基因(cata)表达变化最显著,处理8h表达量上调至处理0h的28倍。【结论】peg6000胁迫处理后主要的抗氧化酶类基因表达发生了明显的变化。
关键词:水稻;聚乙二醇(peg6000);干旱胁迫;抗氧化酶基因;表达分析
中图分类号:s511文献标识码:a文章编号:1008-0384(2019)03-255-09
abstract:【objective】expressionofantioxidantenzymegenesofriceinresponsetodrought-stresswasstudied.【method】simulateddroughtconditionsusingpeg6000onindicaricehang2wereusedfortheexperimentation.theplantsat3-leafstagewereinitiallytreatedwith0%(ck),18%,20%,22%,24%or26%peg6000todeterminetheappropriateconcentrationforthesubsequenttest.undertheselectedpeg6000treatmentlevel,plantsampleswerecollectedat0,2,4,8,12,24,48and72hforanalysis.theexpressionsofantioxidantenzymegenes(i.e.,cata,catbandcatc),peroxidasegenes(i.e.,pox5.1andpox1),superoxidedismutasegenes(i.e.,plastidiccu/zn-sodandcytosoliccu/zn-sod),ascorbateperoxidasegene(i.e.,apx),andglutathionereductasegene(i.e.,gr)ofthericeplantsweredeterminedbyqrt-pcr.【result】basedonthephenotypeandsurvivalrateofthericeplantsinthepreliminarytest,22%peg6000waschosenforthesimulationexperiment.theresultsofqrt-pcrshowedthatall9geneswereupregulatedinitiallyunderthetreatmentbutdownregulatedafterward.mostofthegenessignificantlyupregulated4haftertreatmentshowingaresponseofthegenestothestress.inparticular,cataexhibitedamostsignificantchangeat8hwhichwas28timesofthatat0h.【conclusion】theexpressionofantioxidantenzymegenessignificantlyreactedto
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