生物实验室样品采集规程.pdfVIP

生物实验室样品采集规程 1 目的 为保障检测实验的顺利进行，规范采样程序，防止病原 微生物在采样过程中产生污染。 2 适用范围 适用于实验室样品的采集。 3 职责 3.1 采集检测样品的工作人员在采集过程中应当防止 病原扩散，并对样本的来源、采集过程和处理方法等作详细 记录。 3.2 检验人员必须严格按照本操作规程操作，不可擅自 做出超出本规程的操作，所有实验人员对所从事的工作负相 应的责任。 4 过程要求 4.1 工作要求 采集和处理检测样品应当具备下列条件： 4.1.1 具有采集、处理样品所需要的生物安全防护设 备； 4.1.2 具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员； 4.1.3 具有有效的防止病原扩散的措施； 4.1.4 具有保证检测样品质量的技术方法和手段。 4.2实验材料 准备灭菌的解剖器械（剪刀、镊子、手术刀、大刀、斧 头等）、灭菌试管、平皿或自封袋、载玻片、棉签、营养肉 汤、30%、50%甘油盐水缓冲液、加抗生素的 PBS （病毒保存 液）、50％甘油磷酸盐缓冲液、酒精灯、灭菌注射器、 15mL 的离心管、1.5mLEP 管、记号笔、签字笔、防护服、无粉乳 胶手套、防护口罩、铅笔、空白标签纸、胶布、 75%酒精棉 球、碘酒棉球、冰袋、冷藏容器、消毒药品、采样单等。 4.3 活畜样品的采集 4.3.1 血清样品的采集 4.3.1.1 采血方法 以碘酊或 75%的酒精，对采血部位的皮肤剃（拔）毛消 毒，或直接逆毛消毒，待干燥后采血。采血方法推行生猪站 立式前腔静脉、牛羊站立式颈静脉、禽类翅静脉采血，采血 过程严格无菌。 4.3.1.2 采血数量 单一病种抗体监测的每头（只）采血量为2～3mL，多病 种抗体检测的每头（只）采血量为5～10mL。 4.3.1.3 血清分离 采集好的血液转入试管，斜面放置，室温凝固后直接放 在盛有冰块的保温箱，送实验室。从血液采出到血清分出的 时间不超过10h。 在室温凝固全血2～4h后，有血清析出时，用无菌针剥 离血凝块，然后放入4℃冰箱4～8h后，待大量血清析出时， 吸出血清。必要时经离心机3000rpm 、30min离心，吸出血 清。分离的血清，一般不加防腐剂。血清若在 1～2 周内即 可检验，可放在 4℃冰箱内保存；如果保存时间较长，应放 在-20℃～-80℃冰箱内保存。运送血清时可将血清放在盛有 冰块的保温箱中运送。 4.3.2 全血样品的采集 血液采集后应直接注入盛有抗凝剂的试管中，立即摇 动，充分混合。 4.4 活禽样品的采集 咽喉拭子的采集：将棉签插入喉头及上颚裂处来回刮 3～5次取咽喉分泌液。 泄殖腔拭子的采集：将棉签插入泄殖腔转 2～3 圈并沾 取少量粪便。 将咽喉拭子、泄殖腔拭子一并放入盛有 0.8～1.0mL 加 有抗生素PBS 的EP管中，加盖，编号。 4.5 病死（屠宰）畜禽样品的采集 4.5.1 解剖前检查 急性死亡的牛、羊、猪、马等动物，解剖之前应作临床 检查，疑似炭疽病的应采血、镜检。排除炭疽病时，方可解 剖。动物死亡后应在 6h 内进行剖检。解剖人员要做好自我 防护工作。 4.5.2 肝、脾、肾、淋巴结、肺和牛、马心脏样品的采 集 在肝、脾、肾、淋巴结、肺和牛、马心脏有病变的部位 各采取 2～3cm 的小方块，分别置于灭菌的试管或平皿中。3 其他畜禽采集整个心脏，置于自封袋中。细菌分离样品的采 集可用烧红的刀片烫烙脏器表面，在烧烙部位刺一孔，用灭 菌后的铂金耳伸入孔内，取少量组织或液体，作涂片镜检或 划线接种于适宜的培养基上。 4.5.3 脑、脊髓样品的采集 取脑、脊髓 2～3cm 浸入 50%甘油盐水中或将整个头部3 （猪、牛、马除外）割下，用消毒纱布包裹，置于不漏水的 容器中。 4.5.4 肠、肠内容物及粪便样品的采集 肠样品的采集：选择病变最严重的部分，将其中的内容 物弃去，用灭菌的生理盐水轻轻冲洗后，置于试管中。肠内 容物样品的采集：烧烙肠壁表面，用吸管扎穿肠壁，