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两种方法测定土壤中过氧化氢酶比较 　　摘要：土壤的过氧化氢酶活性可以表征土壤总的生物学活性和肥力状况，文章研究比较了两种测定过氧化氢酶的方法，旨在探索一种高效、準确、适用的土壤过氧化氢酶的测定方法。结果表明，两种测定过氧化氢酶活性的线性关系和浓度适应范围上几乎相同;紫外分光光度法的检出限略低于高锰酸钾滴定法。用两种方法测定四种不同类型土壤的过氧化氢酶活性，结果显示其稳定性和重现性均较好，没有显著性差异。 　　关键词：过氧化氢酶活性;土壤;高锰酸钾滴定法;紫外分光光度法 　　中图分类号：s158文献标志码：a文章编号：2095-2945（2019）15-0145-03 　　abstract：soilcatalaseactivitycanbeusedtocharacterizethetotalbiologicalactivityandfertilityofsoil.inordertoexploreanefficient，accurateandsuitablemethodforthedeterminationofsoilcatalase，twomethodsforthedeterminationofcatalasewerestudiedandcomparedinthispaper.theresultsshowedthatthelinearrelationshipandconcentrationadaptationrangeofthetwomethodsforthedeterminationofcatalaseactivitywerealmostthesame，andthedetectionlimitofuvspectrophotometrywasslightlylowerthanthatofpotassiumpermanganatetitration.thecatalaseactivitiesoffourdifferenttypesofsoilsweredeterminedbytwomethods.theresultsshowedthatthestabilityandreproducibilityofcatalaseactivitiesweregood，andtherewasnosignificantdifferencebetweenthetwomethods. 　　keywords：catalaseactivity;soil;potassiumpermanganatetitration;uvspectrophotometry 　　1实验部分 　　1.1实验原料、试剂与仪器 　　原料：四川省泸州市古蔺县某区域土壤。 　　试剂：（1）0.3%的过氧化氢溶液：将30%的过氧化氢溶液稀释100倍，其浓度用标准高锰酸钾溶液标定。 　　（2）1.5mol/l硫酸：取42ml浓硫酸稀释至500ml。 　　（3）饱和明矾溶液：明矾在20℃溶解度为10.84g，30℃的溶解度为15.41g。 　　（4）0.02mol/l高锰酸钾溶液：称取3.16g高锰酸钾，溶解后定容至1l，其准确浓度用标准草酸钠溶液标定。 　　仪器：hy-5回旋振荡器，uv752型紫外可见分光光度计。 　　1.2实验步骤 　　1.2.1高锰酸钾滴定法测定土壤过氧化氢酶操作步骤 　　称取2.00g土壤于锥形瓶中，加入40ml蒸馏水和5ml0.3%的h2o2溶液，立即加塞密封。振荡20min后加入1ml饱和明矾溶液，立即过滤于盛有5ml1.5mol/l的硫酸溶液的三角瓶中，滤干后，吸取滤液25ml，用0.02mol/l高锰酸钾标准溶液滴定至紫红色，同时做无土对照实验。 　　其中：e：20min内每克土壤分解的h2o2的毫克数表示酶活性;v：为滴定空白所用的kmno4体积;vs：为滴定样品所用的kmno4体积;c：为kmno4浓度;v0：为滴定体积25ml;w：为土重。 　　1.2.2紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶操作步骤 　　称取土样2.00g于锥形瓶，加入40ml蒸馏水和5ml0.3%的h2o2溶液，立即加塞密封。振荡20min后加入1ml饱和明矾溶液，立即过滤于盛有5ml1.5mol/l的硫酸溶液的三角瓶中，滤干后，将滤液直接在240nm处用1cm石英比色皿测定吸光度，同时做无土和无基质对照实验。 　　其中：e：20min内每克土壤分解的h2o2的毫克数表示酶活性;t0：样品空白的h2o2的质量;t剩：样品里反应剩下的h2o2的质量;w：样品的称样量;a0：样品空白的吸光度;a：样品的校正吸光度;ak：对应样品的无基质的