血清蛋白的醋酸薄膜电泳.pptVIP

3．染色 通电完毕后用镊子将薄膜取出，直接浸于氨基黑10B的染色液中，染5 min取出，立即浸入盛有漂洗液的培养皿中，反复漂洗数次，直至背景漂净为止。用滤纸吸干薄膜。 4．定量 本实验不要求进行定量分析，如有需要，可采用薄层扫描仪进行扫描定量，或采用洗脱后再进行比色的方法进行定量。下面为后者的具体操作步骤： 取试管6支，编好号码，分别用吸管取0.4 mol/L氢氧化钠4 ml，剪开薄膜上各条蛋白色带，另于空白部位剪一平均大小的薄膜条，将各条分别浸于上述试管内，不时摇动，使蓝色洗出。约0.5 h后，用分光光度计进行比色，波长用650 nm，以空白薄膜条洗出液为空白对照，读取白蛋白A，α1，α2，β，γ球蛋白各管的吸光度。 5．计算 吸光度 ∑T＝A＋α1＋α2＋β＋γ 各部分蛋白质的百分含量为： 白蛋白％＝（A / ∑T）×100％ α1球蛋白％＝（α1/ ∑T）×100％ α2球蛋白％＝（α2/ ∑T）×100％ β球蛋白％＝（β/ ∑T）×100％ γ球蛋白％＝（γ/ ∑T）×100％ 【实验思考】 1．电泳时，点样端置于电场的正极还是负极？为什么？ 2．电泳后，泳动在最前面的是何种蛋白质？各谱带为何种成分？请分析原因。 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白 【实验目的】 1、了解电泳的一般原理、掌握醋酸纤维