蛋白质类药物的分离纯.pptVIP

将已知分子量的标准蛋白质在SDS -聚丙烯酰胺凝胶中的电泳迁移率对分子量的对数作图，即可得到一条标准曲线。 测定未知分子量的蛋白质在相同条件下的电泳迁移率，根据标准曲线求得其分子量。 测定蛋白质分子量 SDSseparates proteins by MW 十二烷基硫酸钠 ③ 凝胶色谱 利用生物大分子的相对分子质量差异，进行层析/色谱分离的方法。 凝胶层析介质主要是以葡聚糖、琼脂糖、聚丙烯酰胺等为原料，通过特殊工艺合成的层析介质。目前已成为生物化学、分子生物学和生物制药在研究和生产中必不可少的分离介质。 凝胶层析介质是惰性球状凝胶颗粒，内部为多孔网状结构，形成很多孔穴。 凝胶层析原理 凝胶颗粒内部具有多孔网状结构，被分离的混合物流过层析柱时，比凝胶孔径大的分子不能进入凝胶孔内，在凝胶颗粒之间的空隙向下移动，并最先被洗脱出来；比网孔小的分子能不同程度的自由出入凝胶孔内外，在柱内经过的路程较长移动速度较慢，最后被洗脱出来。 凝胶色谱分离 洗脱体积 凝胶色谱分离的应用 生物大分子物质的分离纯化 分子量的测定 分级分离 溶液浓缩 平衡常数的测定 细胞及颗粒的分离 分子量的测定 蛋白质通过凝胶柱的速度，即洗脱体积与其分子量有关: LogM=k1-k2Ve （Ve