正己烷对大鼠血热休克蛋白70和总抗氧化能力的影响.docxVIP

正己烷对大鼠血热休克蛋白70和总抗氧化能力的影响 【中图分类号】r392.12【文献标识码】a【文章编号】1672－3783(2021)06－0033－01 【摘要】目的研究正己烷(n-hexane)对大鼠血中热休克蛋白(hsp70)和总抗氧化能力(t-aoc)的影响。方法40只雄性spraguedawley(sd)大鼠随机分成4组，即低、中、高剂量染毒组(150mg/kg、300mg/kg、600mg/kg)和阴性对照组，每组10只，经腹腔注射染毒后，观察7天，用酶联免疫吸附法和试剂盒分别检测大鼠血中hsp70和t-aoc的含量。结果各剂量组的一般情况与对照组比较均无异常；hsp70随染毒剂量增加而上升，t-aoc随染毒剂量增加而降低，与对照组差异明显(p 【关键词】正己烷;热休克蛋白70;总抗氧化能力 effectofn-hexaneonheatshockprotein70andtotalantioxidantcapacityinrats 正己烷就是直链烷烃类化学毒物，具备低挥发性、低脂溶性和低蓄积促进作用特点，因其工业用途广和刺激性并不大，易致职业人群中毒，严重威胁职业人群的生命安全，职业危害尤为注重，引发学者广为高度关注。基于搞好职业性正己烷中毒早期防治的考量，找寻早期确诊生物指标尤为关键，本研究通过创建急性中毒动物模型，观测通常情况和检测血液中hsp70抒发和t-aoc含量水平，深入探讨正己烷对机体早期毒促进作用与hsp70和t-aoc的生物学意义。 1材料与方法 1.1.1主要仪器与试剂：正己烷(国产分析氢铵)，t-aoc检测试剂盒出售于南京投入使用生物工程研究所，hp70检验试剂盒由厦门慧嘉生物科技有限公司提供更多，2100型分光光度计(尤尼柯仪器有限公司)。 1.1.2动物：健康雄性sprague-dawley(sd)大鼠40只，体重为180～220g，由南华大学实验动物中心提供，自由摄食和饮水，适应饲养1周后进行染毒。 1.2方法 1.2.1动物分组及染毒：将40只雄性sd大鼠随机分为4组，即对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组10只。阴性对照组大鼠仅于腹腔注射5ml／kg生理盐水，低、中、高剂量组大鼠分别以150、300、600mg／kg的剂量各染毒1次，饲养、观察和记录7天大鼠的一般情况（饮食、毛发光泽度、嬉戏活动与灵敏度、大小便性状情况和称取大鼠每天的体重）；7天后后断颈处死，抽出5ml血液，提取血清。 1.3实验方法： 1.3.1血清hsp70抗体滴度的测定方法（具体操作步骤按试剂盒说明书进行）： ①血清按1:100用封闭液吸收，每孔100μl，同时设立空白、阴性和阳性对照，37℃置放2h；②洗板5次，烧熔后重新加入封闭液吸收的辣根过氧化物酶标记的羊抗人igg抗体，37℃置放1h；③洗板5次，烧熔后每孔重新加入100μltmb呈色液，37℃呈色10min，每孔重新加入1mol/lh2so4100μl中止反应；④450nm波长下，用酶标仪（bio2rad）测量每孔喷光度值，即为样本喷光度值/阴性对照喷光度值（s/n）≥2.1认定为阳性。 1.3.2总抗氧化能力（t-aoc)的测定：总抗氧化能力的检测严格按照试剂盒说明书进行，根据公式计算出它们的含量。 1.4统计学处置数据均以（x±s）的则表示，使用spss13.0软件包展开统计分析。四组对象血清hsp70抗体和t-aoc得含量比较用单因素方差分析，组间两两比较用lsd法。以p　　2结果 2.1正己烷对大鼠一般情况的影响：剂量组与对照组比较毛发光泽度和大小便性状无异常、嬉戏活动与灵敏度和饮食均正常,体重与对照组比较无差异。 2.2正己烷对大鼠血中hsp70和t-aoc的影响：hsp70抗体水平随其染毒剂量减少而升高(p=0.000)，t-aoc含量随其染毒剂量减少而减少(p=0.000)，低剂量组对照组指标含量差异存有显著性(p　　3探讨 作为外来有害化学刺激物［1］，进入机体后，易致生物体内环境紊乱，甚至出现急慢性中毒症状［2-3］。为了适应这急剧变化，生物体除通过交感-肾上腺髓质和下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴兴奋为主的神经内分泌反应加以干预外,还促使一些应激脂质过氧化反应与应激蛋白合成而进行调节。 脂质过氧化就是组织细胞受损的一个关键原因,其促进作用机理与水解产生系统和抗氧化系统动态动态过剩有关，异常情况下，例如外源物质步入机体新陈代谢时，就可以产生大量氧化物-自由基［4］，远远超过抗氧化系统能力下限后，即为唤起脂质过氧化病理链式反应的出现，则反击各种生物膜上不饱和脂肪酸，引致细胞结构和功能受损,