细胞计数方法.docVIP

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  • 2022-09-25 发布于天津
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细胞计数方法 试验原理:当待测细胞悬液中细胞匀称分布时,通过测定肯定体积悬液中的细胞的数目,即可换算出每毫升细胞悬液中细胞的细胞数目。 详细操作: 1. 将计数板及盖片擦拭洁净,并将盖片盖在计数板。 2. 将细胞悬液吸出少许,滴加在盖片边缘,使悬液布满盖片和计数板之间,静置3min,留意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。 3. 计算板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按公式计算: 细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104 说明:公式中除以4,由于计数了4个大格的细胞数。 公式中乘以104由于计数板中每一个大格的体积为: 1.0mm(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3 (留意:镜下偶见有两个以上细胞组成的细胞团,应按单个细胞计算,若细胞团10%以上,说明分散不好,需重新制备细胞悬液) ? 细胞计数方法: ①盖好盖玻片:取一套血球计数板,将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。 ②制备计数用的细胞悬液:用吸管吸5滴细胞悬液到离心管中,加入5滴锥虫蓝染液(0.4%)或苯胺黑,活细胞不会被染色,加入染液后就可以在显微镜下区分活细胞和死细胞。 ③将细胞悬液滴入计数板:将待测细胞悬液吹匀称,然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入,要保证盖片下布满悬液,留意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。 ④统计4个大格的细胞数:将血球计数板

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