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不同金属离子对酶活性的影响 金属离子对酶活性的影响 实验目的：1、了解金属离子对酶活性的影响； 2、掌控相同金属离子对酶活性促进作用结果的测量方 酸性磷酸酯酶广泛分布于动物和植物中，植物的种子、霉菌、肝脏和人体的前列腺中。它对生物体核苷酸、磷蛋白和磷脂的代谢，骨的生成和磷酸的利用，都起着重要作用。磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的酶，通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基。磷酸酶的作用与激酶的作用正相反，激酶是磷酸化酶，可以利用能量分子，如atp，将磷酸基团加到对应底物分子上。 本实验采用绿豆芽并作材料，从中抽取酸性磷酸酯酶。以人工合成的对硝基苯磷酸酯（npp）并作底物，水解产生对硝基苯酚和磷酸。在碱性溶液中，对硝基酚盐离子在405nm处为光吸收猛烈，而底物没这种特性。凡是能够提升酶活性的物质泛称为酶的激活剂。无机离子和一些金属离子对酶存有转化成促进作用，可以做为酶的激活剂。其中钾离子就是酸性磷酸酯酶的一种激活剂，它在酶与底物之间起至了桥梁促进作用，构成了酶—金属离子—底物三元复合物，从而更有助于底物与酶的活性中心部位的融合。而氯离子和钠离子对酸性磷酸酯酶的活性 没有什么影响.一些重金属离子如铜离子，对酶活性具有抑制作用。 1、仪器：恒温水浴箱、试管架、试管、分光光度计、 比色皿、吸头、滴管、移液枪、移液管 2、试剂：1.2mmol/lnpp100ml、0.3mol/lnaoh250ml、酸性磷酸酯酶、ph5.0的柠檬酸缓冲液1000ml、2mmol/lfeso4、2mmol/lcuso4、mncl22mmol/l、mgso42mmol/l、kcl2mmol/ledta、实验步骤： fesocusomnclmgso 调零401422344空白edtakcl对照567npp （ml液 l）1111111111111111 l 备注：反应均在37度水浴箱中展开，0号管先重新加入1.0mlnpp后保温15分钟，然后重新加入naoh3ml，搅匀后再提酶液1ml，在波长405nm处为观测od值，以0号管调零实验结果 fesocusomnclmgso （abs）0调零401422344空白edtakcl对照5670.680.301.260.350.340.340.284927124由实验数据获得的图标如下： 以各金属离子为横坐标，a405纵坐标，绘制不同金属离子与酶活力曲线，观察金属离子与酶活力的关系，分析哪些是酶活性激活剂，哪些是酶活性抑制剂。 结果分析：通过实验组与对照组的od值对照所述，确保在适合的温度、ph等外界条件下，再重新加入1ml2mmol/l浓度的各种金属离子溶液，对酸性磷酸酯酶的活力均存有转化成促进作用。它们对酸性磷酸酯酶转化成促进作用的强度由小至大依次为：mncl2、feso4、mgso4kcl、edta、cuso4。可以窥见，重金属对这种酶的转化成促进作用比较弱。