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- 2022-10-02 发布于四川
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Arg54保守位点对嗜热玫瑰红球菌肌氨酸氧化酶的底物适应性和催化效率的影响
肌氨酸氧化酶(sarcosine oxidase, SOX, EC. 1. 5. 3. 1)是一种黄 素氧化酶,催化肌氨酸的甲基脱除反响从而生成甘氨酸,其辅因子是 黄素腺嘿吟二核昔酸(flavin adenine dinucleotide, FAD)或黄素单 核甘酸(flavin mononucleotide, FMN) [1-2] o 近年来,SOX 已被广 泛应用于临床测试中,与肌酸酎酶、肌酸酎酶一起测定人体中肌酎含 量[3]。此外,在食品工业中,基于SOX的生物传感器和探针已被用 于在葡萄酒发醉中测定有机酸和甘油的含量[4-5]。在之前的报道中, 芽泡杆菌属(Bacillussp.)的 SOX(BSOX)基因(GenBank: A Y626822. 2) 在大肠杆菌中高效表达[6-7],但由于疏水基团容易暴露,较长的储 存时间往往导致二级结构的破坏和最终聚集,导致该酶的热稳定性较 差[8]。为筛选出具有良好耐热性的菌株,从来源于美国黄石公园碱 性温泉极端嗜热菌TherommicrobiumroseumDSM 5159[9]的全基因组 中筛选出一个假设的SOX基因(GenBank:ACM06094. 1),命名为TrSOXo 将TrSOX基因插入含有L-鼠李糖诱导的启动子的pRhamTM质粒中, 并在大
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