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　　染色、制片、镜检 染色方法 单染法 复染法 苯胺黑 美兰染色 革兰氏染色 * 第六十三页，共六十九页。 染色原理 革兰氏染色 色差增大，轮廓清晰，便于识别 菌体细胞壁结构不同 固定结构，能够着色，不被水冲掉 染色目的 固定目的 * 第六十四页，共六十九页。 革兰氏染色 结晶紫 初染 酒精 脱色 番红 复染 碘液 媒染 碘液 * 第六十五页，共六十九页。 镜检结果 G+ G- * 第六十六页，共六十九页。 显微镜 * 第六十七页，共六十九页。 微生物检验基本方法 回顾 接种、培养 制片、染色、观察 * 第六十八页，共六十九页。 内容总结 课程内容。第一单元 微生物学基础知识。第三单元 培养基及器皿准备。第二单元 消毒、灭菌方式。第四单元 微生物检验基本方法。微生物并非生物分类学上的名词， 所有个体微小的低等生物通称。G+、G-。一个细菌 一个芽孢。一个芽孢 一个营养体。芽孢特点：壁厚密，折光强，不易着色，耐热，耐杀菌剂，不易杀灭，在高酸中不易萌发。湿热 121℃ 、20-30分。干热 160℃ 、 2小时。Nt = N0 x 2n。丝状真菌，一般多细胞，由营养体与繁殖体构成。菌落形态：大，疏松，绒毛状，絮状，蜘蛛网状，初期无色，后期产生孢子有颜色。个体形态：多数单细胞，卵圆、球形、椭圆形。水 份。0 aw 1。气 体。68 第六十九页，共六十九页。 进化地位 伯杰氏细菌鉴定手册、真菌鉴定手册 原核细胞:有明显核区，无核膜、核仁 真核细胞:有核膜，核仁 细胞核 * （1）按形态分 球菌、杆菌、螺旋状 （2）按细胞结构（染色）分 革兰氏阳性菌 (G+) 革兰氏阴性菌(G-) 革兰氏染色是鉴别细菌种类的重要方法 （3）按代谢类型分： 自养型 光能自养（能量来自光能，以CO2为碳源，蓝细菌、红螺菌） 化能自养（能源和碳源均来自无机物，亚硝化假单胞菌属） 异养型 光能异养（光为能源，有机物为碳源，紫色非硫细菌） 化能异养 （能源和碳源均来自有机物，最普遍的微生物的营养类型） （4）按细菌呼吸类型分（对氧的需求）需氧厌氧（还有严格的）兼性厌氧 细菌有多种不同的形态, 但主要分为三种: 球菌, 杆菌, 螺旋菌. 形状只是细菌特征的一个内容, 其他的特征还包括: 大小, 细胞结构, 运动性, 芽孢, 荚膜, 和细菌之间的相互关系. 细菌间的相对位置也是一个重要的区分特征 球菌当成双排列时叫双球菌(Diplococci ), 链状排列时叫链球菌(Streptococci), 像葡萄状排列叫葡萄球菌 Staphylococci, 当四个或八个聚集排列, 叫八叠球菌(Sarcina ) 杆菌的长度和粗细是不一样的, 有些会形成链状. Bacilli 是小杆的意思 TM-00027:22 革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884年由丹麦医师Gram创立的。革兰氏染色法(Gram stain)不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色(复染颜色)的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。 　　细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁较厚（20～80nm）主要是由肽聚糖和磷壁酸组成的，仅有一层结构，主要成分为肽聚糖，占细胞壁干重的50％～90％。在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液(番红)的颜色，因此呈现红色。 细菌：是一类细胞细而短（直径约0.5-5μm ） 必须借助显微镜才能看到。 菌落：单个或少数细菌细胞繁殖后，形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态结构的子细胞集团。 a.大小：1mm为露滴状菌落,1-2mm为小菌落,2-4mm为中等小菌落,4-6mm大菌落,6mm为巨大菌落。 b.形态：圆形、不规则状，假根状等。 c.隆起度：扩展，台状、低凸状、乳头状等。 d.菌落边缘：边缘整齐、锯齿状、毛刷状等。 e.表面性状：光滑、褶皱、同心环状等。 f.表面光泽：金属光泽、腊状等。 g.颜色透明度：透明、半透明、不透明等。 固定细菌外形 维持新陈代谢，参与呼吸 生长和代谢的活动场所 遗传信息载体 芽孢厚且密的壁，折光性强，不易着色，耐热，耐杀菌剂，不易杀灭，但在高酸中不易萌发 例：枯草杆菌，孢子繁殖时产酸不产气，可造成无菌包装的产酸腐败。 细菌的生长总是对数繁殖. 一个细菌分裂